1.如服用本品后出現高熱(39℃以上,孤立于病史), 特別在治療開(kāi)始時(shí),應停止使用本品,并咨詢(xún)醫生。應 基于喉部、鼻部或耳部癥狀進(jìn)行判斷,熱型應于原發(fā)疾 病引起的發(fā)熱鑒別。2.有報道服用含細菌提取物藥物的易感患者中觀(guān)察到哮 喘發(fā)作的表現。在這些病例,不應繼續服用本品。3.如有持續胃腸、呼吸系統反應,應停止使用本品,并 咨詢(xún)醫生。4.本品可能導致過(guò)敏反應,如服用本品后出現皮膚反 應,應停止使用本品,并咨詢(xún)醫生。
其實(shí)意義不是很大,一般是根據《伯氏細菌手冊》看的,不過(guò)現在基本上都是用16S RNA來(lái)鑒定,要精確一些。
舉例如下:(1)細菌生化試驗 各種細菌所具有的酶系統不盡相同,對營(yíng)養基質(zhì)的分解能力也不一樣,因而代謝產(chǎn)物或多或少地各有區別,可供鑒別細菌之用。用生化試驗的方法檢測細菌對各種基質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物,從而鑒別細菌的種屬,稱(chēng)之為細菌的生化反應。
(2)糖(醇)類(lèi)發(fā)酵試驗 不同的細菌含有發(fā)酵不同糖(醇)的酶,因而發(fā)酵糖(醇)的能力各不相同。其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物亦不相同,如有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣,有的產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。
酸的產(chǎn)生可利用指示劑來(lái)判定。在配制培養基時(shí)預先加入溟甲酚紫[P HS . 2 (黃色)一6 . 8 (紫色)] ,當發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí),可使培養基由紫色變?yōu)辄S色。
氣體產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的杜氏小管中有無(wú)氣泡來(lái)證明。(3)甲基紅(Methylred )試驗(該試驗簡(jiǎn)稱(chēng)MR 試驗) 很多細菌,如大腸桿菌等分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸再被分解,產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸等,使培養基的pH 降低到4 . 2 以下,這時(shí)若加甲基紅指示劑呈現紅色。
因甲基紅指示劑變色范圍是pH4 . 4 (紅色)一pH6 . 2 (黃色)。若某些細菌如產(chǎn)氣桿菌,分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,但很快將丙酮酸脫梭,轉化成醇等物,則培養基的pH 仍在6 . 2 以上,故此時(shí)加入甲基紅指示劑,呈現黃色。
(4)大分子物質(zhì)代謝實(shí)驗. 靛基質(zhì)(口引睬)試驗 某些細菌,如大腸桿菌,能分解蛋白質(zhì)中的色氨酸,產(chǎn)生靛基質(zhì)(叫睬),靛基質(zhì)與對二甲基氨基苯甲醛結合,形成玫瑰色靛基質(zhì)(紅色化合物)。硫化氫試驗 某些細菌能分解含硫的氨基酸(肌氨酸、半肌氨酸等),產(chǎn)生硫化氫,硫化氫與培養基中的鉛鹽或鐵鹽,形成黑色沉淀硫化鉛或硫化鐵。
為硫化氫試驗陽(yáng)性,可借以鑒別細菌。明膠液化實(shí)驗 某些細菌具有膠原酶,使明膠被分解,失去凝固能力,呈現液體狀態(tài),是為陽(yáng)性。
淀粉水解試驗(在紫外誘變中做,本實(shí)驗不做) 細菌對大分子的淀粉不能直接利用,須靠產(chǎn)生的胞外酶(淀粉酶)將淀粉水解為小分子糊精或進(jìn)一步水解為葡萄糖(或麥芽糖),再被細菌吸收利用,細菌水解淀粉的過(guò)程可通過(guò)底物的變化來(lái)證明,即用碘測定不再產(chǎn)生藍色。(5)有機酸鹽及氨鹽利用試驗 檸檬酸鹽利用試驗 檸檬酸鹽培養基系一綜合性培養基,其中檸檬酸鈉為碳的唯一來(lái)源。
而磷酸二氫按是氮的唯一來(lái)源。有的細菌如產(chǎn)氣桿菌,能利用檸檬酸鈉為碳源,因此能在檸檬酸鹽培養基上生長(cháng),并分解檸檬酸鹽后產(chǎn)生碳酸鹽,使培養基變?yōu)閴A性。
此時(shí)培養基中的溟廖香草酚藍指示劑由綠色變?yōu)樯钏{色。不能利用檸檬酸鹽為碳源的細菌,在該培養基上不生長(cháng),培養基不變色。
2、實(shí)驗儀器,材料和用具 (1)實(shí)驗儀器37OC 恒溫培養箱、20OC 恒溫培養箱(室溫代替)。(2)微生物材料 大腸桿菌、變形桿菌、枯草桿菌、產(chǎn)氣桿菌這四種菌種的斜面各1 支。
(3)試劑 甲基紅試劑、V . P 試劑、叫噪試劑、格里斯試劑(硝酸鹽利用試驗)、盧戈氏碘液(淀粉水解試驗) (4)實(shí)驗用具 試管:每份每個(gè)試驗2 根試驗,1 根對照,8 個(gè)試驗共27 根。無(wú)菌乎皿:每份2 個(gè) 杜氏小管:每份6 個(gè)。
接種環(huán)、酒精燈、試管架、記號筆。(5)培養基 葡萄糖發(fā)酵培養基和乳糖發(fā)酵培養基:何份各6 支試管,何支5 一10mi 培養基,滅菌。
用于糖類(lèi)發(fā)酵試驗。葡萄糖蛋白陳水培養基:每份3 支試管,何支5 一10mi 培養基,滅菌。
用于甲基紅和V . P 試驗。胰蛋白水培養基:每份3 支何支5 一10mi 培養基,滅菌。
用于叫睬試驗。檸檬酸鐵錢(qián)或醋酸鉛的半固體培養基;每份3 支,每支5 一10ml 培養基,滅菌。
用于硫化氫試驗。營(yíng)養明膠培養基:每份3 支,每支.5 一10ml 培養基、滅菌。
用于明膠液化試驗。淀粉培養基:每份2 個(gè)平皿,每平皿約20ml 培養基,滅菌后倒入平皿。
用于淀粉水解試驗。檸檬酸鈉培養基:每份3 支,每支5 一IOml 培養基,滅菌,做斜面。
用于檸檬酸鹽利用試驗。3、實(shí)驗步驟 (1)糖(醇)類(lèi)發(fā)酵試驗 編號在各試管上分別標明發(fā)酵培養基名稱(chēng),所接種的菌名和組號,下同。
接種取葡萄糖發(fā)酵培養基3 支,按編號1 支接種大腸桿菌,另1 支接種普通變形桿菌,第3 支不接種,作為對照C 同樣取3 支乳糖發(fā)酵培養基,1 支接種大腸桿菌,1 支接科普通變形桿菌,第3 支不接種,作為對照。將己接種好的培養基置37OC 溫箱中培養24h 。
觀(guān)察結果:被檢細菌若能發(fā)酵培養基中的糖時(shí),則使培養基的pH 降低,這時(shí)培養基中的指示劑呈酸性反應(為黃色),若發(fā)酵培養基中的糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,則培養基不僅顯酸色反應,并且在培養基中倒置的小玻璃管(杜氏小管)中有氣體。氣體占整個(gè)倒置小玻管的10 %以上。
若被檢細菌不分解培養基中的糖,則培養基不發(fā)生變化。(2)甲基紅試驗(MR 試驗) 將大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌分別接種到葡萄糖蛋白陳水培養基中,37OC 培養48h ,加甲基紅指示劑數滴,觀(guān)察結果,呈現紅色者為陽(yáng)性,呈現黃色者為陰性。
(3)伏一普二氏試驗(V . P .試驗) 將被檢菌接種到葡萄糖蛋白陳水培養基中,37OC 培養48h ,取出,加入40 % KOlls 一10 滴,然后再加入等量的5 %。一蔡酚溶液,用力振蕩,再放入37OC 溫箱中保溫巧一30min 。
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