1、流動(dòng)相恢復到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí),流動(dòng)相在恢復到室溫前,基線(xiàn)水平很難穩定,特別是發(fā)生漂移,也容易產(chǎn)生氣泡等現象。水與有機溶劑混合時(shí),混合液變化大,往往會(huì )與室溫相差很大,務(wù)必注意。
2、做HPLC流動(dòng)相的試劑應用HPLC級的、水應用二次蒸餾水,水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換,防止長(cháng)菌變質(zhì)。使用去離子水、針劑水、純凈水(炊用)并不合適、尤其是做梯度洗脫時(shí),水中的不純物會(huì )成為鬼峰,從而干擾分析結果。
3、流動(dòng)相的pH值過(guò)高或過(guò)低,流動(dòng)相使用純水,使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液,使用離子對試劑等,均可能造成色譜柱填料被化學(xué)破壞,這種對色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復的。
4、用緩沖鹽做流動(dòng)相時(shí),在使用前和使用后都要用水清洗流路,絕對禁止將緩沖溶液留在流路中靜置或更長(cháng)時(shí)間。
5、在更換兩種互不相容的流動(dòng)相時(shí),中間要用異丙醇溶液清洗過(guò)渡。例如:先用甲醇水做流動(dòng)相,然后再用正己烷做流動(dòng)相時(shí),一定要先用異丙醇溶液沖洗甲醇水,然后用正己烷沖洗異丙醇,反之也是一樣。在更換流動(dòng)相時(shí)還要考慮色譜柱是否更換。
參考資料來(lái)源:百度百科-流動(dòng)相
1、流動(dòng)相恢復到室溫后使用。
流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí),流動(dòng)相在恢復到室溫前,基線(xiàn)水平很難穩定,特別是發(fā)生漂移,也容易產(chǎn)生氣泡等現象。水與有機溶劑混合時(shí),混合液變化大,往往會(huì )與室溫相差很大,務(wù)必注意。
2、做HPLC流動(dòng)相的試劑應用HPLC級的、水應用二次蒸餾水,水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換,防止長(cháng)菌變質(zhì)。使用去離子水、針劑水、純凈水(炊用)并不合適、尤其是做梯度洗脫時(shí),水中的不純物會(huì )成為鬼峰,從而干擾分析結果。
3、流動(dòng)相的pH值過(guò)高或過(guò)低,流動(dòng)相使用純水,使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液,使用離子對試劑等,均可能造成色譜柱填料被化學(xué)破壞,這種對色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復的。4、用緩沖鹽做流動(dòng)相時(shí),在使用前和使用后都要用水清洗流路,絕對禁止將緩沖溶液留在流路中靜置或更長(cháng)時(shí)間。
5、在更換兩種互不相容的流動(dòng)相時(shí),中間要用異丙醇溶液清洗過(guò)渡。例如:先用甲醇水做流動(dòng)相,然后再用正己烷做流動(dòng)相時(shí),一定要先用異丙醇溶液沖洗甲醇水,然后用正己烷沖洗異丙醇,反之也是一樣。
在更換流動(dòng)相時(shí)還要考慮色譜柱是否更換。參考資料來(lái)源:百度百科-流動(dòng)相。
(1)溶劑對于待測樣品。必須具有合適的極性和良好的選擇性。
(2)溶劑要與檢測器匹配。對于紫外吸收檢測器,應注意選用檢測器波長(cháng)比溶劑的紫外截止波長(cháng)要長(cháng)。所謂溶劑的紫外截止波長(cháng)指當小于截止波長(cháng)的輻射通過(guò)溶劑時(shí),溶劑對此輻射產(chǎn)生強烈吸收,此時(shí)溶劑被看作是光學(xué)不透明的,它嚴重干擾組分的吸收測量。對于折光率檢測器,要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動(dòng)相,以達最高靈敏度。
(3)高純度。由于高效液相靈敏度高,對流動(dòng)相溶劑的純度也要求高。不純的溶劑會(huì )引起基線(xiàn)不穩,或產(chǎn)生“偽峰”。痕量雜質(zhì)的存在,將使截止波長(cháng)值增加50~IOOnm。
(4)化學(xué)穩定性好。不能選與樣品發(fā)生反應或聚合的溶劑。
(5)低粘度。若使用高粘度溶劑,勢必增高壓力,不利于分離。常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度過(guò)于低的溶劑也不宜采用,例戊烷、乙醚等,它們易在色譜柱或檢測器內形成氣泡,影響分離.
流動(dòng)相溶劑使用的注意事項 1.
流動(dòng)相溶劑應選擇HPLC的溶劑或依此為標準的溶劑。流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過(guò)濾、脫氣,清除微粒和灰塵。 在送液泵內,為了防止雜物(固體)進(jìn)入流路,裝有吸濾器,但網(wǎng)孔徑為10μm,比此更小的顆粒仍然可通過(guò),這會(huì )導致流路和柱子堵塞和污染。為此,建議常用0.45μm濾膜過(guò)濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣,如不脫氣,在溶劑混合時(shí),或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡,會(huì )導致泵誤動(dòng)作和輸液不暢,檢測器產(chǎn)生噪聲信號等。 2.
流動(dòng)相恢復到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí),流動(dòng)相在恢復到室溫前,基線(xiàn)水平很難穩定,特別是發(fā)生漂移,也容易產(chǎn)生氣泡等現象。水與有機溶劑混合時(shí),混合液變化大,往往會(huì )與室溫相差很大,務(wù)必注意。 3.
做HPLC流動(dòng)相的試劑應用HPLC級的、水應用二次蒸餾水,水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換,防止長(cháng)菌變質(zhì)。使用去離子水、針劑水、純凈水(炊用)并不合適、尤其是做梯度洗脫時(shí),水中的不純物會(huì )成為鬼峰,從而干擾分析結果。 4.
流動(dòng)相的pH值過(guò)高或過(guò)低,流動(dòng)相使用純水,使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液,使用離子對試劑等,均可能造成色譜柱填料被化學(xué)破壞,這種對色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復的 5。
流動(dòng)相溶劑使用的注意事項 1.
流動(dòng)相溶劑應選擇HPLC的溶劑或依此為標準的溶劑。流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過(guò)濾、脫氣,清除微粒和灰塵。 在送液泵內,為了防止雜物(固體)進(jìn)入流路,裝有吸濾器,但網(wǎng)孔徑為10μm,比此更小的顆粒仍然可通過(guò),這會(huì )導致流路和柱子堵塞和污染。為此,建議常用0.45μm濾膜過(guò)濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣,如不脫氣,在溶劑混合時(shí),或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡,會(huì )導致泵誤動(dòng)作和輸液不暢,檢測器產(chǎn)生噪聲信號等。 2.
流動(dòng)相恢復到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí),流動(dòng)相在恢復到室溫前,基線(xiàn)水平很難穩定,特別是發(fā)生漂移,也容易產(chǎn)生氣泡等現象。水與有機溶劑混合時(shí),混合液變化大,往往會(huì )與室溫相差很大,務(wù)必注意。 3.
做HPLC流動(dòng)相的試劑應用HPLC級的、水應用二次蒸餾水,水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換,防止長(cháng)菌變質(zhì)。使用去離子水、針劑水、純凈水(炊用)并不合適、尤其是做梯度洗脫時(shí),水中的不純物會(huì )成為鬼峰,從而干擾分析結果。 4.
流動(dòng)相的pH值過(guò)高或過(guò)低,流動(dòng)相使用純水,使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液,使用離子對試劑等,均可能造成色譜柱填料被化學(xué)破壞,這種對色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復的 5.
用緩沖鹽做流動(dòng)相時(shí),在使用前和使用后都要用水清洗流路,絕對禁止將緩沖溶液留在流路中靜置過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間。 6.
若需要使用含鹽的流動(dòng)相,使用前請務(wù)必過(guò)濾。并且使用該含鹽流動(dòng)相前,色譜柱需先用低比例有機相(有機相含量應不低于10%)的溶液沖洗,以免緩沖鹽析出。流動(dòng)相若為蒸餾水或含鹽的緩沖液,建議現用現配,以免流動(dòng)相因滋生微生物而造成柱填料的污染。
聲明:本網(wǎng)站尊重并保護知識產(chǎn)權,根據《信息網(wǎng)絡(luò )傳播權保護條例》,如果我們轉載的作品侵犯了您的權利,請在一個(gè)月內通知我們,我們會(huì )及時(shí)刪除。
蜀ICP備2020033479號-4 Copyright ? 2016 學(xué)習?shū)B(niǎo). 頁(yè)面生成時(shí)間:2.571秒