色譜分離法包括哪些具體的方法并簡述其原理(分離純化常用的色譜分離方法)

1.分離純化常用的色譜分離方法有哪些

1、色譜方法根據(jù)分離機(jī)制的不同可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠過濾（分子篩）色譜和親和色譜等。

2、（1）吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑時，由于該吸附劑對不同物質(zhì)有不同的吸附力而使混合物分離的方法。（2）分配色譜系法是利用固定相與流動相之間對待分離組分溶解度的差異來實現(xiàn)分離。

（3）離子交換色譜法是利用離子交換原理和液相色譜技術(shù)的結(jié)合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法。凡在溶液中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法進(jìn)行分離。

（4）凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù)，是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術(shù)，由于設(shè)備簡單、操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對高分子物質(zhì)有很高的分離效果。（5）親和色譜法是將相互間具有高度特異親和性的二種物質(zhì)之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質(zhì)分離的色譜法。

2.色譜法有哪些類型

柱色譜法，又稱層析法。是一種以分配平衡為機(jī)理的分配方法。柱色譜主要分為吸附柱色譜、分配柱色譜兩種。

1. 吸附柱色譜原理

在一定條件下，硅膠與被分離物質(zhì)之間產(chǎn)生作用，這種作用主要是物理和化學(xué)作用兩種.物理作用來自于硅膠表表面與溶質(zhì)分子之間的范德華力.化學(xué)作用主要是硅膠表面的硅羥基與待分離物質(zhì)之間的氫鍵作用。色譜管為內(nèi)徑均勻、下端縮口的硬質(zhì)玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內(nèi)裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果。除另有規(guī)定外，通常多采用直徑為0.07~0.15mm的顆粒。色譜柱的大小，吸附劑的品種和用量，以及洗脫時的流速，均按各品種項下的規(guī)定。

在吸附柱色譜中，吸附劑是固定相，洗脫劑是流動相，相當(dāng)于薄層色譜中的展開劑。吸附劑的基本原理與吸附薄層色譜相同，也是基于各組分與吸附劑間存在的吸附強(qiáng)弱差異，通過使之在柱色譜上反復(fù)進(jìn)行吸附、解吸、再吸附、再解吸的過程而完成的。所不同的是，在進(jìn)行柱色譜的過程中，混合樣品一般是加在色譜柱的頂端，流動相從色譜柱頂端流經(jīng)色譜柱，并不斷地從柱中流出。由于混合樣中的各組分與吸附劑的吸附作用強(qiáng)弱不同，因此各組分隨流動相在柱中的移動速度也不同，最終導(dǎo)致各組分按順序從色譜柱中流出。如果分步接收流出的洗脫液，便可達(dá)到混合物分離的目的。一般與吸附劑作用較弱的成分先流出，與吸附作用較強(qiáng)的成分后流出。

2. 分配柱色譜原理

方法和吸附柱色譜基本一致。裝柱前，先將載體和固定液混合，然后分次移入色譜柱中并用帶有平面的玻棒壓緊；供試品可溶于固定液，混以少量載體，加在預(yù)制好的色譜柱上端。洗脫劑需先加固定液混合使之飽和，以避免洗脫過程中兩相分配的改變。

3.常見的色譜分離方法有哪些

常見的色譜分離方法有哪些

液相色譜按分離機(jī)理分為吸附、分配、交換、排阻以及親和五種類型.

利用組分在吸附劑（固定相）上的吸附能力強(qiáng)弱不同而得以分離的方法，稱為吸附色譜法.固定相是固體，目前這種分離模式在液相色譜中用途很小.

利用組分在固定液或者鍵合固定相（固定相）中溶解度不同而達(dá)到分離的方法稱為分配色譜法.固定相是涂覆的固定液或者鍵合的固定相，是目前主流的分離模式，涵蓋了目前液相色譜應(yīng)用范圍的大部.

利用組分在離子交換劑（固定相）上的親和力大小不同而達(dá)到分離的方法，稱為離子交換色譜法.該分離模式主要用來分離離子型化合物，正是由于如此，現(xiàn)在離子色譜已經(jīng)從液相色譜中分離出來，稱為離子色譜.

利用大小不同的分子在多孔固定相中的選擇滲透而達(dá)到分離的方法，稱為凝膠色譜法或尺寸排阻色譜法.這個主要用來分離高分子子化合物，比如蛋白、比如聚合物.

利用不同組分與固定相（固定化分子）的高專屬性親和力進(jìn)行分離的稱為親和色譜法，常用于蛋白質(zhì)分離.

4.什么是色譜分析法

色譜分析法 chromatography 基于 混合 物 各組 分在體系中 兩相 的物 理化學(xué)性能差異（如吸附、分配差異等）而進(jìn)行分離和分析的方法。

國際公認(rèn)俄國M.C.茨維特為色譜法的創(chuàng)始人。 色譜法體系中的兩相作相對運(yùn)動時，通常其中一個相是固定不動的 ，稱為固定相 ；另一相是移動的 ， 稱為流動相。

在色譜分析過程中，物質(zhì)的遷移速度取決于它們與固定相和流動相的相對作用力。溶質(zhì)和兩相的吸引力是分子間的作用力，包括色散力、誘導(dǎo)效應(yīng)、場間效應(yīng)、氫鍵力和路易斯酸堿相互作用。

對于離子，還有離子間的靜電吸引力。被較強(qiáng)吸引在固定相上的溶質(zhì)相對滯后于較強(qiáng)地吸引在流動相中的溶質(zhì)，隨著移動的反復(fù)進(jìn)行與多次分配，使混合物中的各組分得到分離。

色譜分析法的分類比較復(fù)雜。根據(jù)流動相和固定相的不同，色譜法分為氣相色譜法和液相色譜法。

①氣相色譜法的流動相是氣體 ，又可分為 ： 氣固色譜法 ，其流動相是氣體，固定相為固體；氣液色譜法，其流動相是氣體，固定相是涂在惰性固體上的液體。②液相色譜法的流動相是液體，又可分為？液固色譜法，其流動相是液體，固定相是固體；②液液色譜法，其流動相和固定相均是液體。

按吸附劑及其使用形式可分為柱色譜、紙色譜和薄層色譜。按吸附力可分為吸附色譜、離子交換色譜、分配色譜和凝膠滲透色譜。

按色譜操作終止的方法可分為展開色譜和洗脫色譜。按進(jìn)樣方法可分為區(qū)帶色譜、迎頭色譜和頂替色譜。

經(jīng)色譜分離出的各組分，與已知標(biāo)準(zhǔn)樣品對照進(jìn)行定性分析?，F(xiàn)代化的色譜-質(zhì)譜聯(lián)用或色譜-光譜聯(lián)用儀器，配備有豐富的譜圖庫和微處理機(jī)。

色譜柱流出的組分直接送入質(zhì)譜和光譜儀進(jìn)行定性鑒定和數(shù)據(jù)的定量處理。開發(fā)智能化色譜分析是發(fā)展的主要方向。

色譜法的特點是？①分離效率高?？煞蛛x性質(zhì)十分相近的物質(zhì)，可將含有上百種組分的復(fù)雜混合物進(jìn)行分離。

②分離速度快。幾分鐘到幾十分鐘就能完成一次復(fù)雜物質(zhì)的分離操作。

③靈敏度高。能檢測含量在10-12克以下的物質(zhì)。

④可進(jìn)行大規(guī)模的純物質(zhì)制備。 色譜法在化工、石油、生物化學(xué)、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)、食品檢驗、法醫(yī)檢驗、農(nóng)業(yè)等各個領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。

在各種色譜法中，以氣液色譜法和液固色譜法應(yīng)用最廣。氣相色譜法分離中、小分子化合物比較理想。

中等大小的分子可用液液色譜和液固色譜分離。離子交換色譜一般用于有離子基團(tuán)的物質(zhì)。

分子尺寸再大時，用凝膠滲透色譜分離。薄層色譜和紙色譜法的分析速度快、方便、成本低，柱色譜比薄層色譜和紙色譜具有更高的分辨能力。

5.色譜分離的原理

在色譜法中存在兩相，一相是固定不動的，我們把它叫做固定相；另一相則不斷流過固定相，我們把它叫做流動相.

譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進(jìn)行分離的.

含有樣品的流動相（氣體、液體）通過一固定于柱子或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面；當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用，由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合，實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。

6.色譜法分離是根據(jù)什么原理進(jìn)行的

色譜分離法；chromatographic separation

在工業(yè)上應(yīng)用色譜分析原理分離性質(zhì)近似組分的方法。使溶液分批通過垂直的填充吸附劑固定床，將各種組分分離精制。色譜柱內(nèi)的填充吸附劑是多孔的惰性固體，用非揮發(fā)性的惰性液體涂漬。被分離溶液的溶質(zhì)與惰性液體有大小不同的溶解度。如果被吸附的物質(zhì)是氣體，發(fā)生“吸收”現(xiàn)象。如果被吸附的物質(zhì)是液體，發(fā)生“萃取”現(xiàn)象。分離系數(shù)取數(shù)聚決于分配系數(shù)的大小。常用的操作法有：（1）迎頭分離法，當(dāng)溶液連續(xù)通入吸附固定床時，溶液中諸組分因吸附能力大小不同，可順序地由固定床另一端排出；（2）沖洗分離法，在送入溶液的同時，通入不被吸附的載體，可順序地被吸附和解吸，然后以一定的間隔隔離開；（3）頂替分離法，在載氣中加入吸附能力最強(qiáng)的組分，使依次頂替被吸附的諸組分。色譜分離除已在分析技術(shù)中廣泛應(yīng)用外，也已在化工、冶金和環(huán)保等領(lǐng)域中加以利用。

色譜的分離原理都是利用待測物質(zhì)在流動相和固定相兩相間的分配系數(shù)的不同而實現(xiàn)分離.

對于氣液色譜來說，分離原理是利用不同物質(zhì)在流動相以及固定液中的分配系數(shù)（溶解度）不同而實現(xiàn)分離；當(dāng)流動相流動時，流動相是溶解性相近的惰性氣體，而固定相的溶解性隨固定液的不同而不同，所以分配系數(shù)主要決定于固定液的性質(zhì)。

7.色譜法的分離原理是什么

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色譜法的基本原理：利用樣品混合物中各組分理利用樣品混合物中各組分理、化性質(zhì)的差異，各組分程度不同的分配到互不相溶的兩相中。當(dāng)兩相相對運(yùn)動時，各組分在兩相中反復(fù)多次重新分配，結(jié)果使混合物得到分離。 兩相中，固定不動的一相稱固定相；移動的一相稱流動相。 分類： 根據(jù)兩相的物態(tài)類型，有液-固色譜和液-液色譜兩類基本色譜方法。 液-固色譜的固定相是粉末狀或顆粒狀固體，具有表面吸附活性，流動相是液體?；旌衔镏懈鹘M分在固定相表面上的吸附強(qiáng)度不同，當(dāng)流動相流過時各組分隨流動相的移動速度不同而實現(xiàn)分離。柱色譜、薄層色譜大都屬于這類色譜。 液-液色譜的固定相是附著于載體的液層，流動相是另一種液體?；旌衔镏懈鹘M分在兩液相間的分配系數(shù)不同，則在兩液相中的濃度不同，隨流動相移動的速度也不同，從而實現(xiàn)分離。紙色譜和有些薄層色譜屬于這類色譜。 一、液-固色譜原理 液-固色譜是基于吸附和溶解性質(zhì)的分離技術(shù)，柱色譜屬于液-固吸附色譜。 當(dāng)混合物溶液加在固定相上，固體表面借各種分子間力（包括范德華力和氫鍵）作用于混合物中各組分，以不同的作用強(qiáng)度被吸附在固體表面。 柱色譜分離原理 放大瀏覽 由于吸附劑對各組分的吸附能力不同，當(dāng)流動相流過固體表面時，混合物各組分在液-固兩相間分配。吸附牢固的組分在流動相分配少，吸附弱的組分在流動相分配多。流動相流過時各組分會以不同的速率向下移動，吸附弱的組分以較快的速率向下

8.色譜法分離是根據(jù)什么原理進(jìn)行的

色譜分離法；chromatographic separation在工業(yè)上應(yīng)用色譜分析原理分離性質(zhì)近似組分的方法。

使溶液分批通過垂直的填充吸附劑固定床，將各種組分分離精制。色譜柱內(nèi)的填充吸附劑是多孔的惰性固體，用非揮發(fā)性的惰性液體涂漬。

被分離溶液的溶質(zhì)與惰性液體有大小不同的溶解度。如果被吸附的物質(zhì)是氣體，發(fā)生“吸收”現(xiàn)象。

如果被吸附的物質(zhì)是液體，發(fā)生“萃取”現(xiàn)象。分離系數(shù)取數(shù)聚決于分配系數(shù)的大小。

常用的操作法有：（1）迎頭分離法，當(dāng)溶液連續(xù)通入吸附固定床時，溶液中諸組分因吸附能力大小不同，可順序地由固定床另一端排出；（2）沖洗分離法，在送入溶液的同時，通入不被吸附的載體，可順序地被吸附和解吸，然后以一定的間隔隔離開；（3）頂替分離法，在載氣中加入吸附能力最強(qiáng)的組分，使依次頂替被吸附的諸組分。色譜分離除已在分析技術(shù)中廣泛應(yīng)用外，也已在化工、冶金和環(huán)保等領(lǐng)域中加以利用。

色譜的分離原理都是利用待測物質(zhì)在流動相和固定相兩相間的分配系數(shù)的不同而實現(xiàn)分離.對于氣液色譜來說，分離原理是利用不同物質(zhì)在流動相以及固定液中的分配系數(shù)（溶解度）不同而實現(xiàn)分離；當(dāng)流動相流動時，流動相是溶解性相近的惰性氣體，而固定相的溶解性隨固定液的不同而不同，所以分配系數(shù)主要決定于固定液的性質(zhì)。