藥物中特殊雜質(zhì)檢查方法(如何選擇設(shè)計(jì)藥物中特殊雜質(zhì)檢查方法)

1.如何選擇設(shè)計(jì)藥物中特殊雜質(zhì)檢查方法

特殊雜質(zhì)是指在該藥物的生產(chǎn)和貯存過程中，根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方式和工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)。這類雜質(zhì)隨藥物的不同而異。由于特殊雜質(zhì)多種多樣，檢查方法各異，故一般將其分成四大類：

一、物理法：利用藥物與雜質(zhì)在嗅、味、揮發(fā)性、顏色、溶解及旋光性等上的差異，檢查所含雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定。

二、化學(xué)反應(yīng)法：

（一）容量分析方法：利用藥物與雜質(zhì)在酸堿性及氧化還原性等方面的差異，用標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定來測定雜質(zhì)含量。

（二）重量分析方法：在一定實(shí)驗(yàn)條件下測定遺留物重量。

（三）比色法和比濁法：利用雜質(zhì)特有的呈色反應(yīng)（比色法）和沉淀反應(yīng)（比濁法）與標(biāo)準(zhǔn)對照。

三、色譜法：

（一）紙色譜法（Paper

Chromatography,P.C）：取一定量供試品溶液雜質(zhì)限量對照品溶液，于同一色譜濾紙上點(diǎn)樣，展開，檢出后，比較雜質(zhì)斑點(diǎn)的個數(shù)、顏色深淺或熒光強(qiáng)度等。通常用于極性較大的藥物或放射性藥物的檢查。醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理該法展開時間長、斑點(diǎn)較為擴(kuò)散、不能用強(qiáng)酸等腐蝕性顯色劑。

（二）薄層色譜法（Thin Layer

Chromatography,TLC）：類似紙色譜法，但較簡便、快速、靈敏、不需特殊設(shè)備，適用于有機(jī)雜質(zhì)的檢查。另外，一般將與主藥有密切相關(guān)的原料、中間體、副產(chǎn)物或分解產(chǎn)物等特殊雜質(zhì)稱為有關(guān)物質(zhì)，將甾體類藥物中的特殊雜質(zhì)稱為其它甾體。TLC法按操作方法又可歸納為如下幾種情況：1、在一定供試品及檢查條件下，不允許有雜質(zhì)斑點(diǎn)存在。

2、選用實(shí)際存在的待檢雜質(zhì)作為雜質(zhì)對照品。

3、選用可能存在的某種雜質(zhì)作為雜質(zhì)對照品。

4、將供試品稀釋到適當(dāng)濃度作為雜質(zhì)對照溶液。

5、選用質(zhì)量符合規(guī)定的與供試品相同的藥物作為雜質(zhì)對照品。

（三）高效液相色譜法（High Performance Liquid

Chromatography,HPLC）：本法分離效能高、專屬性強(qiáng)和檢測靈敏，適用于有機(jī)雜質(zhì)，但更多地用于含量測定。

（四）氣相色譜法（Gas

Chromatography,GC）：主要用于揮發(fā)性有機(jī)雜質(zhì)和有機(jī)溶劑殘留量的檢查。

1、揮發(fā)性有機(jī)雜質(zhì)測定方法：（1）面積歸一化法：計(jì)算各雜質(zhì)峰面積及其總和，并求出占總峰面積的百分率，但溶劑峰不計(jì)算在內(nèi)。

(2)主成分自身對照法：先按供試品規(guī)定的雜質(zhì)限度，將供試品稀釋成一定濃度的溶液，作為對照溶液，進(jìn)樣，調(diào)節(jié)檢測器的靈敏度或進(jìn)樣量，使對照溶液中的主成分色譜面積滿足準(zhǔn)確測量要求。然后取供試品溶液，進(jìn)樣，記錄時間，一般應(yīng)為主成分保留時間的倍數(shù)。根據(jù)測得的供試品溶液的各雜質(zhì)峰面積及其總和并與對照溶液主成分的峰面積比較，計(jì)算雜質(zhì)限度。

(3)內(nèi)標(biāo)法測定雜質(zhì)總量限度：供試品按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法配制不含內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖I；再配制含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，同法記錄色譜圖II.如果圖I中沒有與圖II上內(nèi)標(biāo)峰保留時間相同的雜質(zhì)峰，則圖II中各雜質(zhì)面積之和應(yīng)小于內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰面積（溶劑峰不計(jì)在內(nèi)）。

(4)內(nèi)標(biāo)法加校正因子測定供試品中某個雜質(zhì)（或主成分）含量。

(5)外標(biāo)法測定供試品中某個雜質(zhì)（或主成分）含量。

2.生物堿類藥物主要特殊雜質(zhì)是什么

特殊雜質(zhì)檢查：

利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異。

硫酸奎寧中“氯仿-乙醇中不溶物”的檢查鹽酸嗎啡中“其它生物堿”的檢查旋光性的差異：用于硫酸阿托品中“莨菪堿”的檢查對光選擇性吸收的差異：利血平生產(chǎn)或儲存過程中，光照和有氧存在下均易氧化變質(zhì)，氧化產(chǎn)物發(fā)出熒光。因此規(guī)定：供試品置紫外光燈（365nm）下檢視，不得顯明顯熒光。

吸附性質(zhì)的差異：硫酸奎寧制備過程中可能存在“其它金雞納堿”。利用吸附性質(zhì)的差異，采用硅膠G薄層進(jìn)行檢查。規(guī)定限度為0.5%.利用藥物和雜質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)上的差異。

與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀硫酸阿托品制備過程中可能帶入（如莨菪堿、顛茄堿）雜質(zhì)，因此需要檢查“其它生物堿”。利用其它生物堿堿性弱于阿托品的性質(zhì)，取供試品的鹽酸水溶液，加入氨試液，立即游離，發(fā)生渾濁。規(guī)定0.25g藥物中不得發(fā)生渾濁。

3.藥物雜質(zhì)的檢查方法一般分為幾種

一、對照法：又叫限量檢查法，系指取限度量的待檢雜質(zhì)的對照物質(zhì)配成對照液，另取一定量供試品配成供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應(yīng)結(jié)果（比色或比濁）。

由于雜質(zhì)不可能完全除盡，所以在不影響療效和不發(fā)生毒性的原則下，既保證藥物質(zhì)量，又便于制造、貯藏和制劑生產(chǎn)，對于藥物中可能存在的雜質(zhì)，允許有一定限量，通常不要求測定其準(zhǔn)確含量。 《藥典》中規(guī)定的雜質(zhì)檢查均為限量（或限度）檢查（Limit test）。

雜質(zhì)限量是指藥物中所含雜質(zhì)的最大容許量。通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm,parts per million）來表示。

對危害人體健康、影響藥物穩(wěn)定性的雜質(zhì)，必須嚴(yán)格控制其限量。 檢查時可用雜質(zhì)的純品或?qū)φ掌吩谙嗤瑮l件下來比較。

雜質(zhì)限量 = 雜質(zhì)最大允許量/供試品量*100% = 標(biāo)準(zhǔn)溶液體積*標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度/供試品量*100% 或 L = V*C/S*100% 也有不用標(biāo)準(zhǔn)液對比，只在一定條件下觀察有無正反應(yīng)出現(xiàn)。 對于一些保持藥物穩(wěn)定性的保存劑或穩(wěn)定劑，不認(rèn)為是雜質(zhì)，但需檢查是否在允許范圍內(nèi)。

在藥典檢查項(xiàng)下除雜質(zhì)檢查外，還包括有效性、安全性兩個方面。有效性試驗(yàn)是指針對某些藥物的藥效需進(jìn)行的特定的項(xiàng)目檢查，如藥物的制酸力、吸著力、疏松度、凝凍度、粒度、結(jié)晶度等。

安全試驗(yàn)是指某些藥物需進(jìn)行異常毒性、熱原、降壓物質(zhì)和無菌等項(xiàng)目的檢查。 二、靈敏度法：系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定。

三、比較法：系指取供試品一定量依法檢查，測得待檢雜質(zhì)的吸收度等與規(guī)定的限量比較，不得更大。

4.藥典采用的色譜法中 最常用于特殊雜質(zhì)限量檢查的方法是

藥物中雜志限量的控制方法有兩種：一種為限量檢查法，另一種是對雜質(zhì)進(jìn)行含量測定。

限量檢查法不需要進(jìn)行準(zhǔn)確定量，只需檢查雜質(zhì)是否超過限量。

進(jìn)行限量檢查，多采用對照法，靈敏度法，比較法。

1 對照法：取一定量的被檢雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和一定量供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應(yīng)結(jié)果，已確定雜質(zhì)含量是否超過限量。

2靈敏度法：在供試品溶液中加入一定量的試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)。該法不需要雜質(zhì)對照品溶液。如乳酸中枸櫞酸，草酸，磷酸或酒石酸的檢查。

3比較法：取供試品一定量依法檢查，測定特定待檢雜質(zhì)的參數(shù)（如吸光度）與規(guī)定的限量進(jìn)行比較，不得更大。

關(guān)于殘留溶劑，常使用GC。

定量測定主要使用色譜法，包括TLC（鹽酸環(huán)丙沙星中氟喹啉酸檢查）

HPLC（紅霉素中紅霉素BC檢查）