鑒別還原性糖的方法(鑒定還原性糖,脂肪,蛋白質(zhì)的方法)
1.鑒定還原性糖,脂肪,蛋白質(zhì)的方法
實驗步驟：
①還原糖的鑒定步驟：
注入組織樣液2ml 過濾：將玻璃漏斗插入試管中，漏斗上墊一層紗布
加斐林試劑：2ml（由斐林試劑甲液和乙液充分混合而成，不能分別加入）
*斐林試劑：甲液0.1g/mlNaOH溶液
乙液0.05g/mlCuSO4
（等量混合搖勻使用）
水浴加熱：煮沸2min
觀察溶液顏色變化：淺藍色→棕色→磚紅色.
選材：顏色淺，含糖量高
②脂肪的鑒定步驟：
取材：花生種子（浸泡3-4h），將子葉削成薄片
取理想薄片，在薄片上滴2-3滴蘇丹Ⅲ（或蘇丹IV）染液（染色的時間一般為2-3min左右），
去浮色，制成臨時裝片。
*脂肪+蘇丹III--染成橘黃色
脂肪+蘇丹IV---染成紅色
觀察：先在低倍鏡下，找到材料的脂肪滴，然后，轉(zhuǎn)為高倍鏡觀察
③蛋白質(zhì)的鑒定步驟：
選材：卵清稀釋液或黃豆（浸泡1-2d） 豆?jié){ 濾液
染色：先加A液2ml搖勻，再加B液4-5滴搖勻
原理：蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑--紫色反應(yīng)
*雙縮脲試劑：A液0.1g/mlNaOH溶液
B液0.01g/mlCuSO4溶液
2.怎樣鑒別還原性糖
現(xiàn)在潔凈的試管中加入1mL 2%的硝酸銀溶液，然后一邊搖動試管，一邊滴入2%的稀氨水，直到最初產(chǎn)生的沉淀恰好溶解為止（這時得到的溶液通常叫做銀氨溶液）。然后再加入3滴葡萄糖，振蕩后，把試管放在熱水浴中加熱，不久就可以看到試管壁內(nèi)壁上出現(xiàn)銀鏡。這也叫銀鏡反應(yīng)。Ag(NH3)2OH
Ag+ + NH3·H2O = AgOH↓ + NH4+
AgOH + 2NH3·H2O =[Ag(NH3)2]+ + OH- + 2H2O
C6H12O6 + 2[Ag(NH3)2]+ + 2OH- = C6H11O7-（葡萄糖酸） + NH4+ + 2Ag↓+3NH3+3H2O
3.怎么鑒別還原糖啊
還原性糖鑒定：
鑒定原理：生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團（游離醛基或游離酮基）。用斐林試劑、班氏試劑、銀氨溶液等可以檢驗生物組織中還原糖存在與否。
(1)利用斐林試劑：斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下：
CH2OH—（CHOH）4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—（CHOH）4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色→→棕色→磚紅色（沉淀）。
(2)利用班氏試劑：班氏試劑由A液（硫酸銅溶液），B液（檸檬酸鈉和碳酸溶液）配制而成。將A溶液傾注人B液中，邊加邊攪，如有沉淀可過濾。實驗原理與斐林試劑相似，所不同的是班氏試劑可長期使用。班氏試劑A液中的硫酸銅溶液與B液中的無水硫酸鈉和檸檬酸鈉相遇，能產(chǎn)生可溶性的又略能離解出cu2+的檸檬酸銅。
(3)利用銀氨溶液：銀氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水，至最初產(chǎn)生的沉淀恰好溶解為止，這時得到的溶液就是銀氨溶液。銀氨溶液中含有Ag(NH3) 20H（氫氧化二氨合銀），這是一種弱氧化劑，能把醛基氧化成羧基，同時Ag+被還原成金屬銀。還原生成的銀附著在試管壁上，形成銀鏡?？梢?，銀鏡反應(yīng)也可用于鑒定可溶性還原糖。鑒定的結(jié)果是出現(xiàn)銀鏡。
