測定旋光度應(測定液體旋光度時,應注意哪些問題)
1.測定液體旋光度時,應注意哪些問題
旋光儀是用來測定光學活性物質(zhì)旋光能力大小和方向的儀器。光學活性物質(zhì)可以旋轉(zhuǎn)偏振光平面，其大小和方向除了與該物質(zhì)結(jié)構(gòu)有關外，還與測定時的溫度、所用光的波長、溶液的濃度和溶劑、旋光管的長度等有關。
一般單色光源用鈉光燈，波長為589nm，以D表示。規(guī)定以每毫升溶液所含溶質(zhì)的克數(shù)作為質(zhì)量濃度的單位。由旋光儀測得旋光角度后，可以下式計算旋光度：α為用旋光儀測得的旋光度；c為溶液的質(zhì)量濃度（g/ml）;l為旋光管的長度/dm;t為測定時溫度（℃），λ為測定所用光波波長（鈉光以D表示）。
光活性物質(zhì)為液體時，則以密度ρ（g/ml）代替c，即若以100ml溶液含溶質(zhì)的克數(shù)，則，如果糖的水溶液，溶液濃度為5g/100ml，在1dm旋光管中測得旋光角度為-4.64°，則：書寫旋光度時，除注明溫度，光波波長外，在數(shù)據(jù)后的括號內(nèi)，注明其質(zhì)量百分濃度和配制溶液用的溶劑。
旋光性的維相描述
旋光性，可以用左旋光和右旋光具有不同傳播速度維相地進行描述.任何偏正光都可以看成左旋光和右旋光的疊加.把左右旋的光疊加成偏正光時，偏正方向跟兩種光的位相差有關系.如果兩種光傳播速度不同，就會產(chǎn)生附加的維相差，導致偏正光旋轉(zhuǎn).
旋光性和晶體雙折射的類比
雙折射晶體可以將偏振光變?yōu)闄E圓偏振光，或者其他方向的偏振光，將兩塊很薄的雙折射晶體以比較隨意的方向疊加（夾角為ψ），則疊加結(jié)果破壞空間反演不變性。
2.旋光儀的正確使用要注意什么
旋光儀的使用及注意事項： a.測定前應將儀器及樣品置20℃ 士0.5℃ 的恒溫室中或規(guī)定溫度的恒溫室中，也可用恒溫水浴保持樣品室或樣品測試管恒溫lh以上，特別是一些對溫度影響大的旋光性物質(zhì)，尤為重要。
b.未開電源以前，應檢查樣品室內(nèi)有無異物，鈉光燈源開關是否在規(guī)定位置，示數(shù)開關是否在關的位置，儀器放置位置是否合適，鈉光燈啟輝后，儀器不要再搬動。 c. 開啟鈉光燈后，正常起輝時間至少20min，發(fā)光才能穩(wěn)定，測定時鈉光燈盡量采用直流供電，使光亮穩(wěn)定。
如有極性開關，應經(jīng)常于關機后改變極性，以延長鈉燈的使用壽命。 d.測定前，儀器調(diào)零時，必須重復按動復測開關，使檢偏鏡分別向左或向右偏離光學零位。
通過觀察左右復測的停點，可以檢查儀器的重復性和穩(wěn)定性。如誤差超過規(guī)定，儀器應維修后再使用。
e.將裝有蒸餾水或空白溶劑的測定管，放入樣品室，測定管中若混有氣泡，應先使氣泡浮于凸頸處，通光面兩端的玻璃，應用軟布擦干。測定時應盡量固定測定管放置的位置及方向，做好標記，以減少測定管及蓋玻片應力的誤差。
f.同一旋光性物質(zhì)，用不同溶劑或在不同pH值測定時，由于締合、溶劑化和解離的情況不同，而使比旋度產(chǎn)生變化，甚至改變旋光方向，因此必須使用規(guī)定的溶劑。 g.渾濁或含有小顆粒的溶液不能測定，必須先將溶液離心或過濾，棄去初濾液測定。
有些見光后旋光度改變很大的物質(zhì)溶液，必須注意避光操作。有些放置時間對旋光度影響較大的，也必須在規(guī)定時間內(nèi)測定讀數(shù)。
h.測定空白零點或測定供試液停點時，均應讀取讀數(shù)三次，取平均值。嚴格的測定，應在每次測定前，用空白溶劑校正零點，測定后，再用試劑核對零點有無變化，如發(fā)現(xiàn)零點變化很大，則應重新測定。
i.測定結(jié)束時，應將測定管洗凈晾干放回原處。儀器應避免灰塵放置于干燥處，樣品室內(nèi)可放少許干燥劑防潮。
3.旋光度法測葡萄糖濃度實驗的注意事項
1.對觀察者來說，偏振光的振動平面若是順時針旋轉(zhuǎn)，則為右旋（+），這樣測得的+α，也可以代表α ±（n*180）°的所有值。如讀數(shù)為+38°，實際上還可以是218°、398°、-142°等角度。因此，在測定未知物的旋光度時，至少要做一次改變濃度或者液層厚度的測定。如觀察值為+38°，在稀釋五倍后，所得讀數(shù)為+7.6°，則此未知物的旋光度α應該為+7.6°*5=+38°。
2.儀器應放在空氣流通和溫度適宜的地方，并不宜低放，以免光學零部件、偏振片與受潮發(fā)霉及性能衰退。
3. 試管使用后，應及時用水或蒸餾水沖洗干凈，揩干藏好。
4. 鏡片不能用不潔或硬質(zhì)布、紙去揩，以免鏡片表面產(chǎn)生道子等。
5. 儀器不用時，應將儀器放入箱內(nèi)或用塑料罩罩上，以防灰塵侵入。
6. 儀器、鈉光燈管、試管等裝箱時，應按規(guī)定位置放置，以免壓碎。
7. 不懂裝校方法，切勿隨便拆動，以免由于不懂校正方法而無法裝校好。
4.使用分光光度計測定吸光度值應該注意什么
注意事項：1、該儀器應放在干燥的房間內(nèi)，使用時放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上，室內(nèi)照明不宜太強。
熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。2、使用儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。
在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。3、在儀器尚未接通電源時，電表指針必須于“0”刻線上，不是這種情況可以用電表上的校正螺絲進行調(diào)節(jié)。
4、若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100”點，然后再測量。5、指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上，不是這種情況，需進行機械調(diào)零。
6、比色皿使用完畢后，立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。擴展資料：分光光度計操作中故障原因及處理方法1、光門不能完全關閉。
解決方法：修復光門部件，使其完全關閉。2、透過率“100%”旋到底了。
解決方法：重新調(diào)整“100%”旋鈕。3、儀器嚴重受潮。
解決方法：可打開光電管暗盒，用電吹風吹上一會兒使其干燥，并更換干燥劑。4、電路故障。
解決方法：送修理部門，檢修電路。5、光能量不夠。
解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈（盡管燈還亮）。6、比色皿架未落位。
解決方法：調(diào)整比色皿架使其落位。7、光電轉(zhuǎn)換部分老化。
解決方法：更換部件。8、電路故障。
解決方法：調(diào)修電路。9、比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。
解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。10、電路故障（電壓、光電接收、放大電路）。
解決方法：送修。11、預熱時間不夠。
解決方法：延長預熱時間至30分鐘左右（部分儀器由于老化等原因，長時間處于工作狀態(tài)時，也會工作不穩(wěn)）。12、光電管內(nèi)的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。
解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。13、環(huán)境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。
解決方法：改善工作環(huán)境。參考資料來源：百度百科-分光光度計。
