神經(jīng)組織研究方法(神經(jīng)生物學(xué)研究的神經(jīng)組織培養(yǎng)技術(shù)常用方法和作用)

1.神經(jīng)生物學(xué)研究的神經(jīng)組織培養(yǎng)技術(shù)常用方法和作用

神經(jīng)生物學(xué)研究的常用方法

神經(jīng)科學(xué)的發(fā)展與的研究方法的進(jìn)步密切相關(guān)。總體上，神經(jīng)生物學(xué)的研究方法有六大類：形態(tài)學(xué)方法、生理學(xué)方法、電生理學(xué)方法、生物化學(xué)方法、分子生物學(xué)方法及腦成像技術(shù)。

7.1 形態(tài)學(xué)方法

神經(jīng)生物學(xué)研究中常用的形態(tài)學(xué)方法有束路追蹤、免疫組化和原位雜交，其他還有受體定位、神經(jīng)系統(tǒng)功能活動(dòng)形態(tài)定位等方法。

7.1.1 束路追蹤法

追蹤神經(jīng)元之間的聯(lián)系是神經(jīng)解剖學(xué)研究中的重大目標(biāo)，它對(duì)研究神經(jīng)元的功能、神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和成熟都具有重要意義。這種方法學(xué)的建立始于19世紀(jì)末的逆行和順性潰變（順行潰變指胞體或軸突損傷后的軸突終末的潰變，逆行潰變指去除靶區(qū)之后神經(jīng)元胞體的潰變）研究。20世紀(jì)40年代主要手段是鍍銀染色法，根據(jù)變性纖維的形態(tài)變化來判斷變性纖維。20世紀(jì)50年代發(fā)展了Nanta法，能遏制正常纖維的染色而僅鍍?nèi)境鲎冃岳w維。但該法不易顯示細(xì)纖維，1971年Kristenson等將辣根過氧化物酶（HRP）注入幼鼠的腓腸肌及舌肌結(jié)果在脊髓和延腦的相應(yīng)部分運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元胞體內(nèi)發(fā)現(xiàn)HRP的積累 。不久LaVail正式使用HRP作為軸突逆行追蹤，以后遂廣泛應(yīng)用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的研究。HRP可被神經(jīng)末梢、胞體和樹突吸收，軸突損傷部分也可攝入。在胞體內(nèi)，HRP的活性可持續(xù)4~5天，在溶酶體內(nèi)對(duì)聯(lián)苯胺呈陽性反應(yīng)而顯現(xiàn)出來。被標(biāo)記的神經(jīng)元可以清晰的顯示胞體、樹突及軸突。

除了HRP標(biāo)記法，還有熒光物質(zhì)標(biāo)記法、毒素標(biāo)記法、注射染料等方法。

7.1.2 免疫組織化學(xué)

免疫組織化學(xué)術(shù)是應(yīng)用抗原與抗體結(jié)合的免疫學(xué)原理，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)多肽、蛋白質(zhì)及膜表面抗原和受體等大分子物質(zhì)的存在與分布。這種方法特異性強(qiáng)，敏感度高，進(jìn)展迅速，應(yīng)用廣泛，成為生物學(xué)和醫(yī)學(xué)眾多學(xué)科的重要研究手段。近年隨著純化抗原和制備單克隆抗體的廣泛開展以及標(biāo)記技術(shù)不斷提高，免疫組織化學(xué)的進(jìn)展更是日新月異，不僅用于許多基本理論的研究，并取得重大突破，而且也用于疾病的早期快速診斷等臨床實(shí)際。

2.神經(jīng)科學(xué)研究領(lǐng)域有哪些新奇的研究方法

折疊學(xué)科解說八、九十年代，心理學(xué)研究者無不關(guān)注兩個(gè)蓬勃發(fā)展的認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)邊沿交叉學(xué)科的研究，即認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)和認(rèn)知行為遺傳學(xué)。

這兩個(gè)學(xué)科吸收了認(rèn)知科學(xué)和行為發(fā)展科學(xué)的理論與神經(jīng)科學(xué)和遺傳學(xué)的新技術(shù)，共同向智能的本質(zhì)和意識(shí)的起源這一基本的重大理論問題發(fā)起沖擊，將心理學(xué)的研究推向了一個(gè)新的發(fā)展水平，已經(jīng)并且勢(shì)必繼續(xù)對(duì)心理學(xué)的研究產(chǎn)生重大影響。認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)的研究旨在闡明認(rèn)知活動(dòng)的腦機(jī)制，即人類大腦如何調(diào)用其各層次上的組件，包括分子、細(xì)胞、腦組織區(qū)和全腦去實(shí)現(xiàn)各種認(rèn)知活動(dòng)。

傳統(tǒng)神經(jīng)科學(xué)的某些分支，例如神經(jīng)心理學(xué)、心理生理學(xué)、生理心理學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)和行為藥理學(xué)等，吸收了認(rèn)知科學(xué)的理論和神經(jīng)科學(xué)的新技術(shù)，逐漸形成了認(rèn)知神經(jīng)心理學(xué)、認(rèn)知心理生理學(xué)、認(rèn)知生理心理學(xué)、認(rèn)知神經(jīng)生物學(xué)和計(jì)算神經(jīng)科學(xué)等認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)的各個(gè)分支。自八十年代后期發(fā)端以來，認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)的研究在短短時(shí)間內(nèi)取得了令人注目的進(jìn)展，對(duì)傳統(tǒng)認(rèn)知心理學(xué)和發(fā)展心理學(xué)的理論建構(gòu)和各內(nèi)容領(lǐng)域的研究有著巨大影響。

認(rèn)知發(fā)展研究自然也不例外，由于認(rèn)知發(fā)展心理學(xué)和發(fā)展神經(jīng)科學(xué)科學(xué)對(duì)許多共同問題感興趣，由此衍生出來的發(fā)展認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)正得到越來越多人的關(guān)注，成為當(dāng)前最熱門的交叉研究領(lǐng)域之一。折疊學(xué)科分支認(rèn)知科認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)學(xué)的核心學(xué)科分支--認(rèn)知心理學(xué)、心理語言學(xué)、人工智能和人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的研究都取得了重要進(jìn)展，但又都發(fā)現(xiàn)在自己的研究領(lǐng)域內(nèi)出現(xiàn)許多難點(diǎn)，必須在人腦認(rèn)知活動(dòng)機(jī)制中需求答案。

例如，認(rèn)知心理學(xué)和心理語言學(xué)研究中，信息加工的并行和串行方式，外顯機(jī)制和內(nèi)隱機(jī)制，基于經(jīng)驗(yàn)和知識(shí)的認(rèn)知活動(dòng)和靠靈感、頓悟的認(rèn)知活動(dòng)，其腦機(jī)制有何異同？在人工智能和人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的研究中，物理符號(hào)的離散表征和運(yùn)算原理，與亞符號(hào)連續(xù)運(yùn)算原理之間存在何種關(guān)系？人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的學(xué)習(xí)機(jī)制為何需要千萬次訓(xùn)練，而人類的觀察模仿學(xué)習(xí)則一看就會(huì)？這些問題都尖銳提到認(rèn)知科學(xué)各個(gè)分支學(xué)科發(fā)展面前。人類社會(huì)發(fā)展對(duì)智能信息系統(tǒng)越來越高的要求和技術(shù)難題之間的矛盾，使認(rèn)知科學(xué)迫切希望有一個(gè)新生兒來繼承自己未竟的事業(yè)。

生物醫(yī)學(xué)構(gòu)像技術(shù)特別是近年功能性磁共振成像可以用于對(duì)于人類認(rèn)知活動(dòng)的研究；腦事件相關(guān)電位、腦磁圖和高分辨腦成像等生理學(xué)方法，可以為人腦認(rèn)知功能研究提供許多新的數(shù)據(jù)；分子神經(jīng)生物學(xué)和細(xì)胞神經(jīng)科學(xué)，為人腦認(rèn)知障礙和動(dòng)物認(rèn)知行為提供腦內(nèi)機(jī)制的許多科學(xué)數(shù)據(jù)，包括動(dòng)物的學(xué)習(xí)障礙和某些基因序列的關(guān)系。這些都使神經(jīng)科學(xué)有資格孕育一個(gè)徑直研究認(rèn)知活動(dòng)腦機(jī)制的新學(xué)科。

傳統(tǒng)神經(jīng)科學(xué)的某些分支，吸收了認(rèn)知科學(xué)的理論和神經(jīng)科學(xué)的新技術(shù)，就可以成為新學(xué)科分支的組成部分。神經(jīng)心理學(xué)、心理生理學(xué)、生理心理學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、行為藥理學(xué)等都是這些傳統(tǒng)神經(jīng)科學(xué)的分支。

一經(jīng)吸收了認(rèn)知科學(xué)和神經(jīng)科學(xué)新理論和新技術(shù)，這些傳統(tǒng)學(xué)科得到新生，于是，認(rèn)知神經(jīng)心理學(xué)、認(rèn)知生理心理學(xué)、認(rèn)知心理生理學(xué)、認(rèn)知神經(jīng)生物學(xué)、計(jì)算神經(jīng)科學(xué)等逐漸形成。雖然認(rèn)知科學(xué)和神經(jīng)科學(xué)的興起只有20 多年的短暫歷史，由于其高度跨學(xué)科性與高新技術(shù)發(fā)展的密切相關(guān)，兩者又結(jié)合在一起，形成了新的交叉領(lǐng)域---認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)。

在世紀(jì)之交，可以預(yù)見這一領(lǐng)域的發(fā)展將會(huì)帶動(dòng)整個(gè)科學(xué)的發(fā)展，并能順應(yīng)發(fā)展教育事業(yè)的理論需求。下列研究已經(jīng)形成或正在形成國(guó)際前沿。

折疊實(shí)驗(yàn)內(nèi)容腦的認(rèn)知功能包括知覺、注意、記憶、語言和思維以及智能和意識(shí)認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)等心理功能。一百多年來，神經(jīng)生理學(xué)家和解剖學(xué)家一直按機(jī)能定位的指導(dǎo)思想試圖尋找各種認(rèn)知功能的特異腦中樞。

60 年代在治療頑固癲癇的腦手術(shù)病人中，發(fā)現(xiàn)了大腦兩半認(rèn)知風(fēng)格的差異和海馬的記憶功能，曾極大地鼓舞了高級(jí)功能定位論的研究，認(rèn)為海馬是特異的記憶中樞，左半球負(fù)責(zé)抽象思維，右半球負(fù)責(zé)形象思維等。然而，即使這類研究的奠基人和大腦半分工說的創(chuàng)始人，也很快陷入迷惘之中。

因?yàn)榭偸谴嬖诖罅棵艿目茖W(xué)事實(shí)。還在70 年代中期，我們就試圖以"功能模塊"的概念取代定位論或分工說。

經(jīng)過十多年的努力，神經(jīng)病學(xué)家和心理學(xué)家們終于采用雙分離方法學(xué)原則，發(fā)現(xiàn)了人腦功能模塊性或多重功能系統(tǒng)，主要突破表現(xiàn)在多重記憶模塊和復(fù)雜的認(rèn)知功能系統(tǒng)。神經(jīng)生理學(xué)家在猴等動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)研究中，也積累了大量科學(xué)事實(shí)，證明視覺功能存在著背、腹側(cè)系統(tǒng)，至少是枕、頂、顳、額的30 多個(gè)腦皮層區(qū)動(dòng)態(tài)活動(dòng)。

目前，物體真實(shí)運(yùn)動(dòng)和似動(dòng)知覺之間、幻覺和真實(shí)知覺之間、外界引起和主動(dòng)性選擇注意之間的腦功能模塊的異同是引起普遍關(guān)注的研究課題。認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)折疊意識(shí)與無意識(shí)的腦機(jī)制過去20 年間，運(yùn)用雙分離原則，已將記憶至少分離出意識(shí)和無意識(shí)兩類多重記憶系統(tǒng)，在這些研究成果之上，近年涌現(xiàn)出意識(shí)的"全腦工作空間模型" 、"簇化模型"、復(fù)雜性模型"等，對(duì)意識(shí)與無意識(shí)過程進(jìn)行了更為系統(tǒng)性的實(shí)驗(yàn)研究及對(duì)外界客體的真實(shí)知覺和想像之間的腦功能模塊的對(duì)比研究等，這種對(duì)比性分離研究，將會(huì)對(duì)腦高級(jí)功能的認(rèn)識(shí)更加深入。

這類研究一。

3.認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)常用的研究方法有哪些

認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)常用的研究方法

認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)包括兩大類互補(bǔ)的研究方法：一類是無創(chuàng)性腦功能（認(rèn)知）成像技術(shù)，另一類清醒動(dòng)物認(rèn)知生理心理學(xué)研究方法。前一類方法中又分為腦代謝功能成像和生理功能成像兩種；后一類方法中包括單細(xì)胞記錄、多細(xì)胞記錄、多維（陣列）電極記錄法和其他生理心理學(xué)方法（手術(shù)法、冷卻法、藥物法等）。盡管這些方法為人類科學(xué)增添了許多光彩，但遠(yuǎn)未滿足認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)研究的要求。例如，腦認(rèn)知成像技術(shù)可以為我們對(duì)認(rèn)知過程的腦功能形成直觀的圖像，然而這種圖像僅可提供結(jié)構(gòu)或區(qū)域性功能關(guān)系，對(duì)于細(xì)胞水平的機(jī)制顯得過分粗糙。由上述可見，作為當(dāng)代心理學(xué)研究熱點(diǎn)的認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)，是否能夠繼續(xù)閃現(xiàn)光輝，有待于進(jìn)一步的歷史驗(yàn)證。

4.獲取神經(jīng)干細(xì)胞有哪幾個(gè)途徑

而獲取神經(jīng)干細(xì)胞只有三個(gè)途徑，一種是通過胚胎提取，也就是從流產(chǎn)的胎兒身上抽取獲得干細(xì)胞；二是通過克隆，通過抽取動(dòng)物的細(xì)胞注入卵母細(xì)胞，培植成干細(xì)胞；三則是從自身抽取骨髓，然后加入各種誘導(dǎo)因子，在進(jìn)行一些基因的改造和修飾，定向誘導(dǎo)分化成神經(jīng)干細(xì)胞。而前兩種獲取方式會(huì)帶來倫理道德方面的置疑，而且從技術(shù)層面上來說難度也太大。所以從骨髓中進(jìn)行神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)，不僅技術(shù)方面相對(duì)比較成熟，實(shí)驗(yàn)的效果和可靠性也比前兩種要更明顯。

后來應(yīng)腦癱、腦外傷和腦血管瘤三位志愿者患者的家屬強(qiáng)烈要求，研究人員對(duì)他們進(jìn)行了神經(jīng)干細(xì)胞移植手術(shù)，療效目前還正處于觀察之中。如果一切順利的話，不久之后就可以在臨床中普通的推廣應(yīng)用了。

神經(jīng)干細(xì)胞移植是國(guó)際上的一種研究方向，很多研究神經(jīng)干細(xì)胞移植領(lǐng)域的專家、學(xué)者，對(duì)“神經(jīng)干細(xì)胞移植”目前的研究的狀況以及發(fā)展前景都抱有很大的期望，都希望在短時(shí)間內(nèi)能有更大的突破。而對(duì)于發(fā)病率居高不下的偏癱患者來說，如果神經(jīng)干細(xì)胞移植獲得突破并用于臨床，實(shí)則算得上一項(xiàng)造福人類的研究成果。

5.神經(jīng)組織有什么結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

神經(jīng)組織具有接受刺激，產(chǎn)生神經(jīng)沖動(dòng)并傳導(dǎo)神經(jīng)沖動(dòng)的功能。

它由神經(jīng)細(xì)胞（又稱神經(jīng)元）和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞組成。每個(gè)神經(jīng)元都由胞體和突起兩部分組成。

突起分為樹突和軸突兩種。樹突的功能是接受刺激，并傳導(dǎo)神經(jīng)沖動(dòng)給胞體。

每個(gè)神經(jīng)元只有一個(gè)軸突，軸突的功能是將神經(jīng)沖動(dòng)從胞體傳遞給予它聯(lián)系的神經(jīng)元或效應(yīng)器的細(xì)胞。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量比神經(jīng)元多，起支持、絕緣、營(yíng)養(yǎng)、保護(hù)和修復(fù)等作用。

膠質(zhì)細(xì)胞間無突觸聯(lián)系，不能傳導(dǎo)神經(jīng)沖動(dòng)。神經(jīng)纖維是由神經(jīng)元的軸突或長(zhǎng)樹突，外包神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞所構(gòu)成，它分為有髓神經(jīng)纖維和無髓神經(jīng)纖維兩種。

神經(jīng)是大量平行的神經(jīng)纖維集合成束而構(gòu)成的。