保存生物材料方法(保藏菌種的方法)

1.保藏菌種的方法有哪些

1、傳代培養(yǎng)保藏法：包括又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等，培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內保存。

2、液體石蠟覆蓋保藏法：液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間。

3、載體保藏法：載體保藏法是將微生物吸附在適當?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法。

4、寄主保藏法：寄主保藏法用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物。

5、冷凍干燥保藏法：先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥），其中真空冷凍干燥法最常見。

擴展資料

菌種保藏的原理：

菌種保藏有多種方法，其原理大多大同小異，主要是運用一些方式盡量降低生物體內的代謝，達到延長生命，減少變異的目的。通常采用的方法為低溫、缺氧、干燥。

低溫主要對菌種產生兩方面的影響，首先，較低的溫度可以減緩機體細胞的酶活，降低新陳代謝，達到保藏菌種的目的。其次，低溫同時會導致菌體誘發(fā)菌絲自溶機制，如果降溫過程失誤，同樣會造成機體的機械損傷和溶質損傷。

參考資料來源：百度百科——菌種保藏

2.生物保鮮技術有哪些

直接用微生物菌體保鮮 目前人們也有直接用微生物菌體對食品的保鮮防腐進行研究。例如劉紹軍等人[9]用啤酒酵母菌對草莓進行了保鮮研究。結果啤酒酵母菌對草莓的后熟起到推遲作用而減輕草莓腐爛程度。歐體庫爾?瑪合木提等人[10]從葡萄表面分離到一株鏈霉菌H2用于新疆甜瓜的防腐保鮮。在綠茶中摻入嫌氣性蠟樣芽孢桿菌經低溫處理對茶葉的保鮮，該技術已獲得了中國發(fā)明專利（專利號CN1145177A）。國外對一種有益真菌Trichodermaharzanium進行了新西蘭獼猴桃的防霉研究。結果表明，用此方法保護的6000只新西蘭獼猴桃不受霉菌侵染達1a之久。而沒被處理的獼猴桃有一半被Botrytiscinerea霉菌破壞

多糖類物質保鮮細菌、真菌和藍藻類產生的微生物多糖，因其安全無毒、理化性質獨特等而倍受關注。微生物大量產生的多糖，易與菌體分離，可通過深層發(fā)酵實現(xiàn)工業(yè)化生產。微生物多糖已作為成膜劑、保鮮劑應用于食品、制藥等多個領域。例如普魯蘭多糖因其無味、無嗅、無毒、可食用，良好的成膜性，以及優(yōu)良的阻氧效果，可用于食品保鮮作用。從蝦、蟹、昆蟲等節(jié)肢動物的外殼及真菌、藻類等低等植物細胞壁中的早殼素經酸化所得的含氮多糖類物質即殼聚糖，因其具有良好的成膜性與抑菌作用而應用于果蔬的保鮮。對柑橘、草莓、蘋果、獼猴桃、黃瓜、青椒、番茄的保鮮試驗可知[1]：只需017%~2%的殼聚糖的溶液噴灑在果蔬的表面即可在果實表面形成一層薄膜，可阻止果實吸收O2與CO2的排出，從而延緩果實的熟化，達到保鮮的目的

3.常用的菌種保存方法有哪些

菌種保藏是食用菌產業(yè)的一項基礎工作，是確保野生種質資源基因留存和現(xiàn)有生產用種遺傳性能相對穩(wěn)定的必要手段。

菌種保藏的方法多種多樣，有的雖然保藏效果好，但投資高或操作繁雜。在生產實踐中，更需要設備投入少，能保障菌種不死亡、不污染、最大限度地保持優(yōu)良種性的簡便方法，如斜面低溫短期保藏和自然基質較長期保藏相結合的方法。

一般而言，對母種進行長期保存，對原種進行短期保存。須保證優(yōu)良菌種的性狀和活力不發(fā)生變異，不死亡，不被污染，確保其純度。

因此，保存方法應具備取材容易、操作方便、菌種不易退化、長期保存不污染雜菌等優(yōu)點。常用的菌種保存方法如下：（一）斜面低溫保藏 該法的優(yōu)點是保藏方便且所占空間較小。

具體做法是：菌絲長滿斜面后，放在0~5℃保存。以后每隔一定時間（2~3個月）轉管一次。

轉管保存不能長期用PDA培養(yǎng)基，否則種性易退化，灰樹花降解木質纖維素的能力減弱。因此隔一定時間（1年左右）須把菌種轉接到木屑培養(yǎng)基上復壯，之后挑選健壯無污染的菌絲再轉回PDA培養(yǎng)基保存。

在長期保存過程中，要防棉塞受潮滋生雜菌。菌種試管口最好用蠟燙封，以防培養(yǎng)基內水分過快蒸發(fā)。

增加瓊脂用量（2.5%~3%）可減緩水分蒸發(fā)。還要防止菌種管上的標簽脫落而造成種系混雜。

斜面低溫保藏方法簡便易行，能隨時觀察保藏菌株的活力和純度，一旦染雜，肉眼能及時發(fā)現(xiàn)。（二）自然基質保藏 此法是根據(jù)灰樹花的特性，利用自然基質保藏其菌種的方法。

灰樹花是木腐菌，可以采用以木屑為主料的培養(yǎng)基。自然基質營養(yǎng)全面，且大部為緩釋養(yǎng)分，不易產生營養(yǎng)過?；蝠囸I；其次，培養(yǎng)基理化性狀好，可吸收或緩沖菌絲代謝出的有害物質，水分與通氣協(xié)調平衡，部分菌絲扎入基質內生長，不裸露于空氣中，菌絲呼吸強度低，生命力強。

1.原料與配方 粗、細木屑比例適當，采用板栗樹木屑最佳，粗木屑粒徑為2毫米左右，細木屑為一般圓盤鋸屑，粗、細的比例為1∶2，添加干木屑重量20%的麩皮和1%的糖，含水率為60%左右。這樣的基質通氣性好，營養(yǎng)豐富且供菌絲分解利用的時間長，長到基質內部的菌絲比包裹在基質外部暴露于空氣中的菌絲耐受性強。

不同粒徑的基質比例適當，還能協(xié)調氣與水的矛盾。粗粒過多，架空菌絲多；細粒過多，透氣性差，菌絲生長慢。

應用配方如下：栗木屑78%，麩皮20%，石膏1%，蔗糖1%，水65%配料，裝入較粗大的試管中，裝料量為試管的1/3~1/2,1.5千克/厘米2滅菌1.5小時。冷卻后，接入需保藏的菌種，在28℃下培養(yǎng)，待菌絲長滿木屑培養(yǎng)基時取出換上無菌橡皮塞，在0~5℃冰箱內保藏1~2年轉管一次。

2.容器與裝量 采用容量250毫升的葡萄糖玻璃瓶，清洗潔凈，裝量一般不超過玻璃瓶容量的3/5，填料不能過滿，瓶壁所殘留的顆粒須擦拭干凈，否則保藏的菌種易引起污染。3.滅菌和冷藏 滅菌時若采用棉塞封口，基質表層易失水，接種成活率低，即使菌絲復活，生長也很緩慢，所以最好采用聚丙烯膜封口，接種后換用無菌棉塞培養(yǎng)，待菌絲長滿后再換成有孔滅菌膠塞冰箱保藏。

用上述方法保藏的菌種經3年貯放后，接出成活率均達90%以上，出菇驗證產量及子實體形態(tài)特征均無明顯變化。因此，自然基質保藏法具有保存期長，菌種遺傳性能相對穩(wěn)定的特點。

（三）木粒PDA斜面保藏 灰樹花在自然狀態(tài)下易發(fā)生于栗樹根部，這說明其營養(yǎng)需求較為特殊。根據(jù)灰樹花這種習性，在PDA基礎上添加適量的栗樹木粒制成母種培養(yǎng)基。

在多年的使用中發(fā)現(xiàn)，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的母種生長勢好，在轉接原種時，適應能力強，萌發(fā)定植快；用作菌種保藏基質時，保藏時間長，并能很好保持菌種的優(yōu)良性狀。1.木粒PDA的制作 選取栗樹邊材，加工成0.3~0.5厘米的顆粒，及時烘干或曬干備用。

稱取葡萄糖10克，KH2PO41克，1溶解于1升清水中配制成營養(yǎng)液。將營養(yǎng)液倒入盛有木粒的小鋁鍋中，營養(yǎng)液以完全浸沒木粒為準。

煮沸10分鐘，以加快木粒對營養(yǎng)液的吸收速度，起鍋靜置30分鐘讓木粒吸足營養(yǎng)液。撈出木粒，瀝掉表面的水，裝入試管，裝量為試管長的1/6，最多不得超過試管長的1/5，否則在擺制斜面時，不易使木粒均勻分散于斜面的表面上。

選取新鮮的馬鈴薯，去皮并切成薄片，稱取200克放入小鋁鍋中，加入1升清水，文火煮沸30分，趁熱過濾取汁，并補足1升的體積。稱取瓊脂20克，葡萄糖20克，KH2PO4 2克，MgSO47H2O 2克。

先將瓊脂剪碎，加入到馬鈴薯濾液中，繼續(xù)用文火加熱，使瓊脂溶化。待瓊脂完全溶化后，加入稱好的其他3種營養(yǎng)成分，攪拌使這些物質溶解均勻，趁熱裝入已裝有木粒的試管中，裝至試管長的1/3處，塞上棉塞。

在0.8~1千克/厘米2蒸氣壓下滅菌40分，待氣壓降至0時，開蓋取出，趁熱輕輕抖拍試管，使木粒分散后即可擺制斜面，并使木粒呈半裸狀分布于斜面上，待凝固后便制成了木粒PDA培養(yǎng)基。2.生長及保藏效果 木粒PDA斜面上培養(yǎng)的灰樹花母種，菌絲生長迅速、良好，12天即可長滿試管，但菌絲的后期生長勢更為粗壯、濃密，后勁足。

轉接原種時，菌種適應力強，定植快。這表明，灰樹花菌絲的生長速度、生長勢不僅取決于本身的遺。

4.微生物檢驗材料的保存方法是什么

微生物檢驗材料的保存方法如下：（1）液體樣品。

黏液、滲出物、膽汁、血液等，最好收集 在滅菌的小試管或青霉素瓶中，密封后用紙或棉花包裹，裝人較 大的容器中，再裝瓶（或盒）送檢。（2）做棉試蘸取的鼻液、濃汁、糞便等樣品。

應將每支棉 試剪斷或燒斷，投入滅菌試管內，立即密封管口，包裝送檢。（3）實質臟器。

在短時間內（夏季不超過20小時，冬季不 超過2天）能送到檢驗單位的，可將樣品的容器放在裝有冰決的 保溫瓶內送檢。短時間不能送到的，供細菌檢查的，放于滅菌流 動石蠟或滅菌的甘油生理鹽水中保存；供病毒檢查的，放 于滅菌的50%甘油生理鹽水中保存。

5.儲存食物的方法有哪些

食物種類繁多，性質各異，適應的環(huán)境各不相同。因此儲存食物首先要熟悉各種食物的特點.了解影響食物變化的原因，采取適當?shù)拇鎯Ψ椒?。只有這樣才能有效保持食物的外觀（形狀、色澤）和內在的質量（質地、營養(yǎng)成分），防止烹飪食物發(fā)生腐爛、腐敗、變質等情況，減少不必要的損失，避免浪費。

一、低溫儲存法

低溫儲存法是儲存烹飪食物級常用的方法。其主要原理是通過低溫有效地抑制微生物的生長和繁殖，降低酶的活性，減弱食物內的化學反應，較好的保持食品原有的風味和營養(yǎng)價值。

低溫儲存按其溫度的不同可分為冷藏法和冷凍法，冷藏的溫度是在冰點以上。

采用冷藏的食物主要有蔬菜、鮮肉、鮮魚、水果、奶制品以及熟制品和半成品等食物。冷凍法是將食物在低于冰點的環(huán)境中凍結，適用于儲存動物性食物等。冷凍法可以使食物保存較長的時間不變質。但是長時間存放，雖然食物的質且變化不大.但水分減少，其背養(yǎng)價值降低，吃起來口感也不好。另外，兩種以上食物存放在同一個冷凍箱內時，要用無毒害的食品袋密封隔離。預防氣味相互污染.同時也可減少食物水分的流失。

二、高溫儲存法

高溫儲存法是餐飲業(yè)儲存食物經常使用的方法，因為微生物對高溫的承受能力弱，當溫度提高時可有效地殺滅微生物.并破壞酶的活性.可防止微生物對食物的影響，達到儲存食物的目的。其方法是先將食物用開水煮透或蒸透（達到100度以上的高溫），取出或仍用原湯泡上.放在涼爽通風的地方不攪動，防止食物重新被污染。采用此方法可使食物在較長的時間內不變質。這種方法適用于保存動物性食物的成品和半成品以及水發(fā)干貨類等食物。

三、通風儲存法

通風儲存法主要適用于保存糧食、干貨食物和需要風干的食物.它們的特點都是怕霉、怕捂。例如米、面、花生、蔬菜等食物，在儲存的時候都需要通風.這樣可使霉菌不易生長，保持食物的原有成分，減少霉變。

四、腌、漬、醬、泡儲存法

此種方法一般是用鹽、糖、醋、醬和五香料，按照一定的比例方法加人食物內，使食物吸收一定的濃度。來抑制微生物的生長.達到長期保存食物的目的。例如：腌菜制品有咸蘿卜條、咸豆角、糖醋蒜等。醬菜制品有醬五香大頭菜、醬黃瓜、醬八寶菜等。泡菜制品有泡洋白菜、泡辣椒、泡茄子等。

通過腌、漬、醬、泡等處理后的食物，一般營養(yǎng)價值會降低，因為食物中一部分維生素、無機鹽被破壞和損失.特別是動物性食物的纖維肌會變硬.不易被人體吸收消化。但是加工烹調后香味濃郁，口味極好。這種儲存食物的方法簡單易行，在飲食行業(yè)中得到廣泛應用。

五、煙熏儲存法

煙熏是用鋸未、松拍枝等材料，在不完全燃燒的情況下所產生的煙氣來熏烤食品的一種方法，經煙熏后的食物不但減少了食物內部的水分，而且煙氣中有殺菌和防腐作用的木焦油、雜酚油等附在食物的表面上.能防止細菌的生長，從而達到防腐儲存的作用，一般常見的熏制品有熏魚、熏雞、熏肉等。

六、真空密封保存方法

真空密封保存方法是使食物在真空的狀態(tài)下，不與空氣中的微生物接觸.進行密封保存食物的一種方法，如罐裝制品、真空包裝制品等。此方法適用于多種食物的保存。

隨著科學技術的不斷發(fā)展，儲存食物的方法也越來越多，如核輻射儲存法、氣調

法等都是比較先進的方法，它們的主要原理就是控制或殺死食物中生長的微生物，延緩原料內部組織新陳代謝，從而延長食物的保存時間，提高儲存的質量，達到保存的目的。

6.如何保存基因材料

基因重組的材料是基因片段（含有目的基因）。那么，這些用于基因重組的基因片段是怎樣保存的呢？生命體的細胞中含有該生物遺傳的全部密碼。為了改造某一生物，把含有目的基因的片段導入該生物的細胞中去，才能培育出帶有外源基因的轉基因生物（動物、植物或微生物）。問題是這個含有外源基因的片段，不是隨時隨地可以覓到的，必須事先保存在一個地方，這就是基因文庫。它是存放基因的“倉庫”。

生物的全部基因就在細胞內的DNA上，這是一條很長的鏈。指揮生物的一切秘密全在上面。遺傳工程科學家為了基因重組方便，就采取先把一種生物細胞中的全部DNA或染色體上的DNA的所有片段，隨機地連接到基因載體上，然后移植到宿主細胞中進行增殖，形成各個片段的無性繁殖系。這樣，該生物的全部基因片段就在宿主細胞內一個不留地全部復制出來。

這好比拍電影，先拍分鏡頭（相當于基因片段），拍好全部鏡頭后進行剪接，配上錄音，就是一部電影了。有了這個電影片子，就可以復制出許許多多相同內容的電影。

從70年代起，科學家已建立了大腸桿菌、酵母菌、果蠅、雞、兔以及大豆、水稻等多種生物的基因文庫。我們要取這些生物的任何一個基因片段進行重組，都非常容易了。

用于偵破的基因指紋

大家知道，在現(xiàn)代偵破手段中，利用指紋尋找罪犯，捉拿兇手，是非常有效的。這是因為世界上幾乎沒有兩個人的指紋是相同的。不同的指紋，實際就代表不同的人。只要在自己的指頭上涂以油墨或者印泥，捺在白紙上就能印出清楚的指紋。因此，在犯罪現(xiàn)場尋覓指紋是極其重要的任務。

現(xiàn)在還有利用基因指紋作為偵破手段的?；蛑讣y是遺傳學上的概念。原來，人的基因雖然大體上都是一致的，但是仍有不同，而且同樣找不出兩個人會有相同的基因（雙胞胎也有微小區(qū)別）。根據(jù)基因密碼，經過特殊處理，也會顯示出如同條形碼那樣的紋形——黑白相間，這就是基因指紋。

現(xiàn)代科學技術能從一滴血、一根頭發(fā)或者一口唾液中發(fā)現(xiàn)基因指紋。如果是一個殺人犯，他在與被害者搏斗過程中，很可能弄破自己的皮膚而留下極少的血跡。刑偵人員從血跡中就可以找到基因指紋。當刑偵人員從疑犯身上獲得基因指紋，如與現(xiàn)場血跡的基因指紋一致，那么疑犯就成了百分之百的兇手。至于對強奸犯的偵破，利用精液獲得基因指紋，在國外已經成了常用的偵破手段。

基因指紋用于現(xiàn)代偵破雖然歷史還很短，但已經受到特別的重視。

7.專利申請對生物材料保藏有什么規(guī)定

專利申請涉及從未公開過的生物材料（如質粒、細菌、真菌、藻類、動植物細胞系等）的，須在專利申請同時或申請日起四個月內向國家知識產權局提交其認可單位出具的生物材料保藏和存活證明。

不需要保藏的生物材料：在國內外商業(yè)上公眾能買到的生物材料；各國專利局或國際專利組織指定的用于專利程序的保藏機構保藏的生物材料，在向我國提交的專利申請享有的優(yōu)先權日或申請日前已在專利公告中公布或已授權的，均不用保藏。

需要保藏的生物材料：個人或單位持有的，在非用于專利程序保藏機構保藏的，并對公眾不公開發(fā)放的，或在申請日（優(yōu)先權日）前公眾不能得到的，如通過篩選、突變、重組DNA等手段新創(chuàng)制的生物材料，均要求保藏。