動(dòng)物細胞的方法特點(diǎn)是(培養條件下,動(dòng)物細胞生理特點(diǎn))
1.培養條件下,動(dòng)物細胞有哪些生理特點(diǎn)
物細胞培養的應用
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細胞培養是指細胞在體外條件下的生長(cháng)，動(dòng)物細胞在單獨細胞培養的過(guò)程中不再形成個(gè)體。
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概念
動(dòng)物細胞培養（animalcellculture）就是從動(dòng)物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然后，放在適宜的培養基中，讓這些細胞生長(cháng)和增殖。
簡(jiǎn)介
1.動(dòng)物細胞培養液的成分：體外細胞培養所需營(yíng)養物質(zhì)與體內基本相同，例如，需要糖、氨基酸、無(wú)機鹽、促生長(cháng)因子、微量元素等。將細胞所需的上述物質(zhì)按其種類(lèi)和所需數量嚴格配制而成的培養基，稱(chēng)為合成培養基。由于動(dòng)物細胞生活的內環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入動(dòng)物血清以提供一個(gè)類(lèi)似生物體內的環(huán)境，因此在使用合成培養基時(shí)，通常需加入血清、血漿等一些天然成分。[1]
2.動(dòng)物細胞培養液的特點(diǎn)：液體培養基、通常含動(dòng)物血清。
3.動(dòng)物細胞培養的條件：
①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：對培養液和所有培養用具進(jìn)行無(wú)菌處理，通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外應定期更換培養液，以便清除代謝產(chǎn)物防止細胞代謝產(chǎn)物累積對細胞自身產(chǎn)生危害。
②營(yíng)養物質(zhì)：無(wú)機物（無(wú)機鹽、微量元素等），有機物（糖、氨基酸、促生長(cháng)因等）
血清和血漿 但血清和血漿不是營(yíng)養物質(zhì)。
③溫度和pH(36.5±0.5℃，7.2~7.4)
④氣體環(huán)境（95%的空氣+5%CO 2的混合氣體）
其中5%CO2氣體是為保持培養液的pH穩定
3.基本過(guò)程
取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細胞，將處理后的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，成為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長(cháng)到互相接觸時(shí)，細胞就會(huì )停止分裂增殖，出現接觸抑制。此時(shí)需要將出現接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外，原代培養就是從機體取出后立即進(jìn)行的細胞、組織培養。當細胞從動(dòng)植物中生長(cháng)遷移出來(lái)，形成生長(cháng)暈并增大以后，科學(xué)家接著(zhù)進(jìn)行傳代培養，即將原代培養細胞分成若干份，接種到若干份培養基中，使其繼續生長(cháng)、增殖。通過(guò)一定的選擇或純化方法，從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞稱(chēng)為細胞株。當培養超過(guò)50代時(shí)，大多數的細胞已經(jīng)衰老死亡，但仍有部分細胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變出現了無(wú)限傳代的特性，即癌變。此時(shí)的細胞被稱(chēng)為細胞系。
2.動(dòng)物細胞培養的特點(diǎn)
細胞培養方式大致可分為兩種：一種是群體培養（mass culture），將含有一定數量細胞的懸液置于培養瓶中，讓細胞貼壁生長(cháng)，匯合（confluence）后形成均勻的單細胞層；另一種是克隆培養（clonal culture），將高度稀釋的游離細胞懸液加入培養瓶中，各個(gè)細胞貼壁后，彼此距離較遠，經(jīng)過(guò)生長(cháng)增殖每一個(gè)細胞形成一個(gè)細胞集落，稱(chēng)為克隆（clone）。一個(gè)細胞克隆中的所有細胞均來(lái)源于同一個(gè)祖先細胞。此外，為了制取細胞產(chǎn)品而設計了轉鼓培養法，使用大容量的圓培養瓶，在培養過(guò)程中不斷地轉動(dòng)，使培養的細胞始終處于懸浮狀態(tài)之中而不貼壁。
細胞系名稱(chēng)
細胞類(lèi)型
來(lái)源
3T3
成纖維細胞
小鼠
HeLa
宮頸癌上皮細胞
人
BHK21
成纖維細胞
敘利亞倉鼠
PtKl
上皮細胞
袋鼠
L6
成肌細胞
大鼠
PCI2
嗜鉻細胞
大鼠
SP2
漿細胞
小鼠
SP2/0
骨髓瘤漿細胞
小鼠
CHO
卵巢細胞
中國地鼠
