指將微生物接種到培養(yǎng)基內(nèi),經(jīng)一定條件使微生物生長繁殖。
接種的方法有 6種。①涂布法:將純菌或含菌材料均勻地涂布在固體培養(yǎng)基表面。
②劃線法:用接種環(huán)沾取含菌材料,在固體培養(yǎng)基表面劃線。③傾注法:取少許含菌材料放入無菌培養(yǎng)皿中,然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養(yǎng)基,搖勻后冷卻凝固。
④點植法:用接種針在固體培養(yǎng)基表面接觸幾點。⑤穿刺法:用接種針沾取的微生物經(jīng)穿刺而進入半固體深層培養(yǎng)基中。
⑥浸洗法:用接種針挑取含菌材料,在液體培養(yǎng)基中洗下。培養(yǎng)方法則根據(jù)微生物對氧的要求情況分為需氧和厭氧兩種。
需氧培養(yǎng)是指必須在有氧環(huán)境中進行培養(yǎng),必要時用振蕩或通氣攪拌達到充分供氧;厭氧培養(yǎng)是培養(yǎng)過程一直保持在少氧或無氧的環(huán)境中。厭氧的方法可用物理、化學、生物等辦法使培養(yǎng)容器內(nèi)的氧氣部分或全部消除。
通常用抽真空方法,有時將兩種方法結合使用,使厭氧培養(yǎng)更為理想。接種、培養(yǎng)是食品微生物應用、研究過程中最基本和必不可少的方法。
高中生物涉及到的微生物及代謝類型
乳酸菌、硝化細菌(代謝類型,其中乳酸菌是厭氧微生物);
肺炎雙球菌S型、R型(遺傳的物質(zhì)基礎);
結核桿菌和 麻風桿菌(胞內(nèi)寄生菌);
根瘤菌、圓褐固氮菌(固氮菌);
大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌(為基因工程提供運載體,也可作為基因工程的受體細胞,其中大腸桿菌是厭氧微生物);
蘇云金芽孢 桿菌(為抗蟲棉提供抗蟲基因);
假單孢桿菌 (分解石油的超級細菌);
甲基營養(yǎng)細 菌、谷氨酸棒狀桿菌、黃色短桿菌(微生物的代謝);
鏈球菌(一 般厭氧型);
產(chǎn)甲烷桿菌 (嚴格厭氧型)等
1905年,德國微生物學家科赫因?qū)Y核桿菌和結核菌素的研究取得重大成就而榮獲諾貝爾獎金。
他發(fā)明固體培養(yǎng)基,用它分離培養(yǎng)細菌,創(chuàng)造細菌的純粹培養(yǎng)法。他又改進細菌染色法,為研究細菌的形態(tài)和結構創(chuàng)造有利條件。
荷蘭科學家E.C.翰遜教授研究使啤酒發(fā)酵的酵母,創(chuàng)造單細胞的純粹培養(yǎng)法。以后,又有人采用純粹培養(yǎng)法選擇適當酵母,用于啤酒的工業(yè)生產(chǎn),為純粹培養(yǎng)法在工業(yè)發(fā)酵上的應用開辟了道路。
翰遜的學生哈斯發(fā)現(xiàn),當時用的由明膠制成的固體培養(yǎng)基很容易發(fā)生液化現(xiàn)象,使用時有困難。哈斯的妻子建議用瓊脂代替明膠,獲得了較好的效果。
這種瓊脂培養(yǎng)基被后人采用,一直沿用到今天。后來又有人創(chuàng)造一種培養(yǎng)皿,可供微生物平板分離用。
從此以后,分離出的微生物日益增多,新的微生物不斷被發(fā)現(xiàn)。這樣,可供工業(yè)用的微生物也日益充實起來,一支微生物生力軍異軍突起。
我只知道有關厭氧菌的一些東西:
厭氧菌尚無公認的確切定義,但通常認為這是一類只能在低氧分壓的條件下生長,而不能在空氣(18%氧氣)和(或)10%二氧化碳濃度下的固體培養(yǎng)基表面生長的細菌。按其對氧的耐受程度的不同,可分為專性厭氧菌、微需氧厭氧菌和兼性厭氧菌。
厭氧菌種類:脆弱類桿菌群、產(chǎn)色素普雷活特和卟啉單胞菌、解脲類桿菌群、核梭桿菌、厭氧革蘭陰性桿菌、厭氧革蘭陰性球菌、厭氧革蘭陽性球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、其他被狀芽胞桿菌、厭氧革蘭陽性桿菌。
希望對你有幫助。
厭氧菌的培養(yǎng)方法
厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養(yǎng)厭氧菌,必須創(chuàng)造一個無氧的環(huán)境。通常用培養(yǎng)基中加入還原劑,或用物理、化學方法去除環(huán)境中的游離氧,以降低氧化還原電勢。如皰肉培養(yǎng)基、硫基乙酸鈉培養(yǎng)基,牛心腦浸液培養(yǎng)基等。常用的厭氧培養(yǎng)方法有許多,可根據(jù)實際情況選用。
1.厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養(yǎng)基試管,可放入?yún)捬醺變?nèi)培養(yǎng),厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學的方法使缸內(nèi)造成厭氧環(huán)境,從而將厭氧菌培養(yǎng)出來。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來培養(yǎng)厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內(nèi)裝氣體發(fā)生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內(nèi)空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內(nèi)在半小時內(nèi)造成無氣環(huán)境。如不突變表示袋內(nèi)已達厭氧狀態(tài),可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止國際上公認的培養(yǎng)厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內(nèi)進行操作,故名。箱側(cè)有一交換室,具有內(nèi)外二門,內(nèi)門通箱內(nèi)先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態(tài),然后手伸入手套把交換室內(nèi)門打開,將物品移入箱內(nèi),關上內(nèi)門。箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài),也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調(diào)節(jié)溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內(nèi),還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養(yǎng)研究,大量培養(yǎng)基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動調(diào)節(jié)。
4.厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷售。
5.生物耗氧法:在一密閉的容器內(nèi)放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時產(chǎn)生二氧化碳,供細菌生長用。我沒見過。
6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,均勻撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,用融化的白蠟封邊,造成一個封閉空間。焦性末食子酸與堿反應后耗氧。該法用于厭氧不嚴格的厭氧菌的培養(yǎng),簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養(yǎng)基:本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養(yǎng)法。皰肉和肉湯裝入大試管,液面封凡士林,造成無氧環(huán)境。
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