接種微生物實(shí)際上就單單指把微生物移種到需要的地方,至于你說(shuō)的方法,應該說(shuō)是在一些情況下根據不同的需要采取不同的操作手段從而讓微生物的某些特性表現出來(lái)。那么這些操作手段其實(shí)是很多的,并不限于固定的操作方式,完全可以合理地自行設計,也不太好歸納。
比如,如果只需要在液體中增菌,那么只需要稍微將帶菌的接種環(huán)碰一下液體培養基就可以了;需要分離單個(gè)菌落,往往采取的是四區劃線(xiàn)法轉種瓊脂平板;需要觀(guān)察動(dòng)力,往往穿刺接種于動(dòng)力培養基;需要觀(guān)察單個(gè)菌落和周?chē)囵B基環(huán)境的作用往往采取點(diǎn)種;需要計數活菌菌落,往往傾倒瓊脂接種,等等等等。
常用的免疫接種方法有如下幾種:
(1)點(diǎn)眼、滴鼻法
是雛禽常用的免疫方法。常用的疫苗有新城疫Ⅱ系或Ⅳ系苗、雞傳染性法氏囊病弱毒苗、雞傳染性支氣管炎弱毒苗、雞傳染性喉氣管炎弱毒苗等。
(2)飲水法
適用于大群禽群體,方法簡(jiǎn)單適用,應激反應小。新城疫Ⅱ系或Ⅳ系苗、傳染性法氏囊病苗、球蟲(chóng)苗、傳染性支氣管炎苗均可適用。為提高免疫效果,常在飲用水加入少量的脫脂奶粉(每升水加1.6克奶粉),稀釋疫苗的水不宜太多,通常控制在30分鐘內飲完,在飲前控水2小時(shí),要保證每只禽都能飲到疫苗稀釋液。
(3)肌肉注射法
此法吸收好、作用快、劑量準,缺點(diǎn)是費工費時(shí),適用4周齡以上禽類(lèi)。常用于新城疫油乳苗、雞產(chǎn)蛋下降綜合征油乳苗、禽霍亂組織滅活菌苗、禽腦脊髓炎油乳苗及多種高免血清或高免卵黃抗體。
(4)頸部皮下注射法
此法常用于1日齡雛雞接種馬立克氏病疫苗、雞新城疫油乳苗、雞病毒性關(guān)節炎油乳苗、雞傳染性貧血滅活疫苗等。
(5)氣霧免疫法
此法適用于規模化、集約化程度高的禽場(chǎng)大群禽的免疫,省工省時(shí),只要技術(shù)要領(lǐng)掌握好則效果也確切。常用于雞新城疫的Ⅱ系或Ⅳ系苗以及傳染性支氣管炎弱毒苗的免疫。作氣霧免疫時(shí)噴槍的霧滴大小成雞直徑應在5~10微米,雛雞應在30~50微米為宜,疫苗宜使用蒸餾水或去離子水稀釋。
(6)皮膚刺種法
此法是用消毒過(guò)的蘸水筆尖蘸取稀釋好的疫苗在翼下無(wú)毛及無(wú)血管處刺種一下即可。常用于禽痘苗、新城疫Ⅰ系苗的免疫。
預防免疫已成為家禽疾病防治中的重要環(huán)節,在生產(chǎn)實(shí)踐中常用的免疫接種方法有滴鼻、點(diǎn)眼免疫法,飲水免疫法,注射免疫法和噴霧免疫法,必須掌握正確的免疫接種方法及其注意事項。具體選用哪種接種方法應根據疫苗種類(lèi)、日齡及免疫目的而定,一般應以疫苗的說(shuō)明書(shū)為準。
(1)滴鼻、點(diǎn)眼免疫
滴鼻、點(diǎn)眼免疫能確保每只鴨得到準確疫苗量,達到快速免疫,形成良好的局部免疫,抗體效果好,用于弱毒活疫苗的接種,適應于任何日齡,對于幼雛來(lái)說(shuō),這種方法可以避免或減少疫苗病毒被母源抗體的中和,免疫效果較好。這種免疫法可以產(chǎn)生整齊、均勻的免疫力,節省疫苗,但是逐只接種,比較費時(shí)費力。操作時(shí)應使用廠(chǎng)家配套的稀釋液和滴頭;配制疫苗時(shí)搖動(dòng)不要太劇烈;疫苗要現配現用,2小時(shí)內用完;疫苗避免受熱和陽(yáng)光照射;點(diǎn)眼時(shí)滴頭距離眼1厘米,以防戳傷眼;滴鼻時(shí),用食指封住一側鼻孔,以便疫苗滴能快速吸入;滴鼻、點(diǎn)眼時(shí),待疫苗在眼或鼻孔吸收后再放開(kāi)鴨;免疫接種后的廢棄物應焚毀。
(2)飲水免疫
飲水免疫是一種便捷的接種方法,在生產(chǎn)中應用較多,將一定量疫苗放入水中讓鴨自由飲用,通過(guò)吞咽疫苗,病毒離子經(jīng)腭裂、鼻腔、腸道,產(chǎn)生局部免疫及全身免疫。比個(gè)體免疫省時(shí)省力,但飲水免疫疫苗用量多,免疫不均勻,個(gè)體飲入疫苗量不準確。為保證免疫效果,必須注意用于飲水免疫的疫苗是高效價(jià)的,免疫前可加免疫增效劑;免疫前后3天不能飲水消毒;免疫前后1~2天禁止使用抗病毒藥物;免疫前視季節和舍溫情況限水2~3小時(shí),以便及時(shí)飲水,并在短時(shí)間內飲完;在水中加入0.2%~0.3%的脫脂奶粉;不能使用金屬器皿,稀釋疫苗用水量要適當,使用清潔不含氯、鐵等離子的水稀釋。
(3)注射免疫
注射接種最常用的是皮下注射、皮內注射、肌內注射、靜脈注射等免疫方法。注射接種時(shí),要注意油乳劑疫苗啟封后,要在當天用完,活疫苗在2小時(shí)內用完;接種過(guò)程中,注意搖勻疫苗;注射器要嚴格消毒,勤換針頭;接種前將油乳劑疫苗放置至溫度25℃左右,一般至室溫;疫苗使用時(shí)不要直接傾倒,以免污染,可以用干凈的連續注射器抽取;接種過(guò)程中注意調校注射器以保證劑量準確;油乳劑疫苗如有凍結破裂現象、異物或雜質(zhì)存在不能使用;注射兩種油乳劑疫苗時(shí),應避免兩種疫苗接種在同一點(diǎn)上。
(4)噴霧免疫
此方法是用壓縮空氣通過(guò)氣霧發(fā)生器,使稀釋的疫苗形成直徑1~10微米的霧化粒子,均勻的浮游于空氣中,隨呼吸而進(jìn)入體內,以達到免疫的目的。免疫前后可使用抗應激的藥物,來(lái)增強免疫效果。操作時(shí),應該注意使用高效價(jià)的疫苗,劑量加倍;用蒸餾水或去離子水稀釋疫苗;霧粒直徑以1~10微米為最佳;氣霧免疫時(shí)房舍應密閉,減少空氣流動(dòng),并應無(wú)直射陽(yáng)光為好。這種方法省時(shí)省力,適宜大群的免疫接種,有時(shí)會(huì )誘發(fā)呼吸道疾病。
微生物接種
常用的接種方法有以下幾種:
1)劃線(xiàn)接種 這是最常用的接種方法。即在固體培養基表面作來(lái)回直線(xiàn)形的移動(dòng),就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環(huán),接種針等。在斜面接種和平板劃線(xiàn)中就常用此法。
2)三點(diǎn)接種 在研究霉菌形態(tài)時(shí)常用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點(diǎn),讓它各自獨立形成菌落后,來(lái)觀(guān)察、研究它們的形態(tài)。除三點(diǎn)外,也有一點(diǎn)或多點(diǎn)進(jìn)行接種的。
3)穿刺接種 在保藏厭氧菌種或研究微生物的動(dòng)力時(shí)常采用此法。做穿刺接種時(shí),用的接種工具是接種針。用的培養基一般是半固體培養基。它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養基中心向管底作直線(xiàn)穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動(dòng),則在穿刺線(xiàn)周?chē)軌蛏L(cháng)。
4)澆混接種 該法是將待接的微生物先放入培養皿中,然后再倒入冷卻至45°C左右的固體培養基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之后,置合適溫度下培養,就可長(cháng)出單個(gè)的微生物菌落。
5)涂布接種 與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然后再將菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作來(lái)回左右的涂布,讓菌液均勻分布,就可長(cháng)出單個(gè)的微生物的菌落。
6)液體接種 從固體培養基中將菌洗下,倒入液體培養基中,或者從液體培養物中,用移液管將菌液接至液體培養基中,或從液體培養物中將菌液移至固體培養基中,都可稱(chēng)為液體接種。
7)注射接種該法是用注射的方法將待接的微生物轉接至活的生物體內,如人或其它動(dòng)物中,常見(jiàn)的疫苗預防接種,就是用注射接種,接入人體,來(lái)預防某些疾病。
8)活體接種 活體接種是專(zhuān)門(mén)用于培養病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種于活的生物體內才能生長(cháng)繁殖。所用的活體可以是整個(gè)動(dòng)物;也可以是某個(gè)離體活組織,例如猴腎等;也可以是發(fā)育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養。
免疫接種是將疫苗或菌苗經(jīng)一定途徑接種于雞體,使雞在不發(fā)病的情況下產(chǎn)生免疫應答,從而在一定時(shí)期內對某種傳染病具有抵抗力。
不同的疫苗,對接種方法有不同的要求,為了發(fā)揮疫苗的應有效力,接種的方法應盡量接近疾病自然的傳播方式。常用于免疫接種的方法有以下幾種。
(1)滴鼻與點(diǎn)眼 適用于新城疫Ⅱ系和Ⅳ系苗、“傳染性支氣管炎”弱毒苗等,優(yōu)點(diǎn)是只要操作認真,則每只雞的接種量比較均勻,缺點(diǎn)是比較費工。
滴鼻和點(diǎn)眼可用滴管、空眼藥水瓶或5毫升注射器(針尖磨禿),事前用1毫升水試一下,看有多少滴。2周齡以下的雛雞以每毫升50滴為好,每雞2滴,每毫升滴25只雞,如果1瓶疫苗是用于250只雞的,就稀釋成250/25=10毫升。比較大的雞以每毫升25滴為好,上述1瓶疫苗就要稀釋成20毫升。疫苗應當用生理鹽水或注射用水稀釋?zhuān)灰擞美溟_(kāi)水,以免其中的鹽堿等雜質(zhì)殺死一部分病毒,影響效果。
滴鼻與點(diǎn)眼的效果沒(méi)有明顯差別,每雞兩滴可以滴在一個(gè)鼻孔、兩個(gè)鼻孔或鼻眼各一滴,不過(guò)一只眼內不能容納2滴。要看到每一滴疫苗確實(shí)被雞吸進(jìn)鼻腔或在眼內耗下去,才能將雞放開(kāi)。
(2)飲水法 是把疫苗混入水中讓雞自由飲用。它的優(yōu)點(diǎn)是省工省時(shí),適用于大群雞同時(shí)接種,應激反應小,缺點(diǎn)是由于飲水不均等以及其他因素的干擾,免疫效果不整齊,疫苗用量大,適于飲水的疫苗有新城疫疫苗、傳染性支氣管炎疫苗、傳染性法氏囊弱毒疫苗等。
飲水免疫的注意事項:
疫苗效價(jià)應高,要加大1.5~2倍用量。
配制疫苗的水中不能含有任何損害疫苗的物質(zhì),如氯、鐵、銅、鋅等離子和消毒劑,最好用冷開(kāi)水。
飲水器要充分洗干凈,不含上述有害物質(zhì),數量要充足,保證雞同時(shí)都能飲到水。
飲水中應加0.2%的脫脂奶粉或2%的脫脂牛奶,以保護疫苗或病毒。
含有疫苗的飲水應在2小時(shí)之內飲完,要做到這一點(diǎn),事先要停供飲水3~5小時(shí)(依不同季節酌定)。停水后,雞的渴欲較強,2小時(shí)的飲水量大約是:5~7日齡每雞4~5毫升,10~14日齡8毫升,20日齡12毫升,28日齡17毫升,40~45日齡28毫升,開(kāi)產(chǎn)前80毫升。雞飲完后再停食1小時(shí)。
飲水免疫必須反復進(jìn)行,至少應在2天內進(jìn)行2次,以保證免疫效果。
(3)刺種法 此法適用于雞痘疫苗、新城疫疫苗等。刺種時(shí)按100頭份疫苗加1毫升生理鹽水、蒸餾水或冷開(kāi)水,溶化均勻,用刺種針或鋼筆尖蘸取疫苗,在翅下無(wú)血管處刺種1~2下,要保證每只雞得到小米粒大小的一滴疫苗。
(4)注射法 此方法是把疫苗注射到皮下或肌肉內,其劑量準確,效果確實(shí),但費時(shí)費工。適用于雞馬立克氏病疫苗、新城疫Ⅱ系疫苗、雞霍亂苗和各種滅活苗,注射時(shí)凍干苗按每頭份加稀釋液0.5~1毫升溶勻后在頸部或胸部或其他部位的皮下或肌肉內注射0.5~1毫升。馬立克氏病苗必須用廠(chǎng)家指定的專(zhuān)用稀釋液,稀釋后每只雛雞頸部皮下注射0.2毫升。各種滅活苗(鋁膠苗或油苗)按說(shuō)明用量皮下或肌肉注射。
胸部肌肉注射時(shí)針頭不可垂直刺入或刺入過(guò)深,以免刺傷內臟引起死亡,腿部注射應在外側肌肉豐滿(mǎn)處注射,不可在內側注射以免刺傷血管和神經(jīng)引起出血和跛行。
(5)氣霧 氣霧免疫的方法,是將雞置于密閉的室內,用專(zhuān)門(mén)的氣霧器將稀釋過(guò)的疫苗噴成極細的小滴,彌漫在空氣中,使雞吸入肺部深入及氣囊。此法適用于“傳支”弱毒苗等,免疫效果比較好,但對雞的呼吸器官刺激較大,常引起不良反應,故較少應用。
接種常見(jiàn)方法有:平板劃線(xiàn)接種法、斜面接種法、傾注培養法、穿刺接種法、液體接種法。
一、平板劃線(xiàn)分離法
平板劃線(xiàn)分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)在平板培養基表面,通過(guò)分區劃線(xiàn)稀釋而得到較多獨立分布的單個(gè)細胞,經(jīng)培養后生長(cháng)繁殖成單菌落,通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。
二、斜面接種法
該法主要用于單個(gè)菌落的純培養、保存菌種或觀(guān)察細菌的某些特性。
三、穿刺接種法
穿刺培養,是指將帶有欲培養微生物的接種針深插至半固體培養基(瓊脂含量0.2%?1.0%)中接種,并進(jìn)行微生物固體深層培養的一種方法,主要用于厭氧或兼性厭氧微生物的培養。
四、液體接種法
液體培養,是指將微生物直接接種于液體培養基中,并不斷振蕩或攪拌,使微生物均勻地在液體培養基中生長(cháng)繁殖的一種培養方法。液體培養適用于好氧微生物和植物組織培養,以迅速得到大量繁殖體為目的。
五、涂布接種法
微生物學(xué)實(shí)驗中的一種操作方法。由于將含菌材料現加到還較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡,而且采用稀釋倒平臺法也會(huì )使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長(cháng),因此在微生物學(xué)研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。
擴展資料:
接種注意事項
1、每次接種時(shí)間最長(cháng)不得連續超過(guò)2小時(shí)。
2、操作時(shí),接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重換工具,種塊碰到外面物體則作廢。
3、一般用種量:每支試管母種可擴繁一級種100支左右;擴接原種6~8瓶。
參考資料:搜狗百科-接種
參考資料:搜狗百科-平板劃線(xiàn)分離法
參考資料:搜狗百科-涂布平板法
參考資料:搜狗百科-穿刺培養
參考資料:搜狗百科-斜面法
參考資料:搜狗百科-液體接種
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